Pāriet uz saturu
RG2
Audums
Smadzenes
Slimība
Žurku ļaundabīgā glioma
Sinonīmi
RG-2, Rat Glioma-2, D74, D74-RG2

Dokumenti

RG2

Cell line · Preces numurs 300649

The RG2 cell line is derived from a chemically induced glioma in Fischer 344 rats. Generated via transplacental administration of N-ethyl-N-nitrosourea (E...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

RG2 šūnu līnija ir iegūta no ķīmiski inducētas gliomas Fischer 344 žurkām. RG2 gliomas, kas radītas, transplacentāri ievadot N-etil-N-nitrozurīnvielu (ENU), tiek klasificētas kā anaplastiskas gliomas, jo tām ir invazīvs augšanas modelis, augsts mitotiskais indekss un nediferencēta morfoloģija. Šie audzēji izceļas ar to pastāvīgo letalitāti in vivo un spēju augt singēniskajos saimniekorganismos, neizraisot būtisku imūnreakciju. Šī zemā imunogenitāte padara RG2 par ideālu modeli glioblastomai līdzīgu audzēju izpētei un eksperimentālu terapiju testēšanai imūnkompetentos apstākļos.

RG2 gliomas šūnām piemīt augstas pakāpes gliomām raksturīgās īpašības, tostarp ātra proliferācija, invazīva spēja un genoma izmaiņas. Pētījumos ir uzsvērta audzēja supresoru gēnu, piemēram, CDKN2A, zaudēšana, kā arī traucēta PDGF, Ras un IGF signalizācijas ceļu regulācija. Šūnu līnija aug kā nediferencētas vārpstas formas šūnas in vitro, saglabājot savu audzēja potenciālu, ja tās implantē intrakraniāli, kur tās uzrāda difūzu invāziju normālos smadzeņu audos, imitējot cilvēka glioblastomu.

Šī šūnu līnija ir plaši izmantota pirmsklīniskajos pētījumos, lai novērtētu dažādu terapeitisko pieeju, tostarp ķīmijterapijas, staru terapijas, gēnu terapijas un imūnterapijas, efektivitāti. RG2 gliomas ir īpaši vērtīgas, lai pārbaudītu jaunas zāļu piegādes metodes, piemēram, konvekcijas pastiprinātu piegādi (CED), un lai pētītu asins-smadzeņu barjeras traucējumu mehānismus gliomās. Tās histopatoloģiskā un molekulārā līdzība ar cilvēka glioblastomām uzsver tās lietderību neiroonkoloģijā.

Audums
Smadzenes
Slimība
Žurku ļaundabīgā glioma
Pieteikumi
3D šūnu kultūras, neirozinātne
Sinonīmi
  • RG-2
  • Rat Glioma-2
  • D74
  • D74-RG2

02Klasifikācija

Organisms
Žurka
Sekss
Nav norādīts
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Gliālais
Tumorogēns
Jā, CD Fischer žurkām

04Identifikatori

Atsauce
RG2 (Cytion kataloga numurs 300649)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10116
Cellosaurus
CVCL_3581

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Šķirne / pasuga
Fischer 344
Donora vecums
20 dienas pēc grūtniecības