Přejít na obsah
RG2
Tkáň
Mozek
Nemoc
Maligní gliom potkana
Synonyma
RG-2, Rat Glioma-2, D74, D74-RG2

Dokumenty

RG2

Cell line · Číslo výrobku 300649

The RG2 cell line is derived from a chemically induced glioma in Fischer 344 rats. Generated via transplacental administration of N-ethyl-N-nitrosourea (E...

€430.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie RG2 je odvozena z chemicky indukovaného gliomu u potkanů Fischer 344. Gliomy RG2, které vznikly transplacentárním podáním N-ethyl-N-nitrosourey (ENU), jsou klasifikovány jako anaplastické gliomy vzhledem k jejich invazivnímu způsobu růstu, vysokému mitotickému indexu a nediferencované morfologii. Tyto nádory se vyznačují stálou letalitou in vivo a schopností růst v syngenních hostitelích, aniž by vyvolaly významnou imunitní odpověď. Díky této nízké imunogenitě je RG2 ideálním modelem pro studium glioblastomům podobných nádorů a testování experimentálních terapií v imunokompetentním prostředí.

Gliomové buňky RG2 vykazují vlastnosti typické pro gliomy vysokého stupně, včetně rychlé proliferace, invazivní schopnosti a genomických změn. Studie zdůraznily ztrátu nádorových supresorových genů, jako je CDKN2A, spolu s dysregulovanými cestami zahrnujícími signalizaci PDGF, Ras a IGF. Buněčná linie roste jako nediferencované vřetenovité buňky in vitro a zachovává si svůj tumorigenní potenciál i při intrakraniální implantaci, kdy vykazuje difuzní invazi do normální mozkové tkáně, čímž napodobuje chování lidského glioblastomu.

Tato buněčná linie byla hojně využívána v preklinickém výzkumu k hodnocení účinnosti různých terapeutických přístupů, včetně chemoterapie, radioterapie, genové terapie a imunoterapie. Gliomy RG2 jsou zvláště cenné pro testování nových metod podávání léčiv, jako je například podávání s využitím konvekce (CED), a pro zkoumání mechanismů narušení hematoencefalické bariéry u gliomů. Jejich histopatologická a molekulární podobnost s lidskými glioblastomy podtrhuje jejich užitečnost v translační neuroonkologii.

Tkáň
Mozek
Nemoc
Maligní gliom potkana
Aplikace
3D buněčné kultury, Neurovědy
Synonyma
  • RG-2
  • Rat Glioma-2
  • D74
  • D74-RG2

02Klasifikace

Organismus
Krysa
Sex
Nespecifikováno
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Gliální
Tumorogenní
Ano, u potkanů CD Fischer

04Identifikátory

Citace
RG2 (katalogové číslo Cytion 300649)
Daňové identifikační číslo NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_3581

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Plemeno / poddruh
Fischer 344
Věk dárce
20 dní po březosti