RG2
Cell line · 製品番号 300649
The RG2 cell line is derived from a chemically induced glioma in Fischer 344 rats. Generated via transplacental administration of N-ethyl-N-nitrosourea (E...
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01概要
- 説明
RG2細胞株は、フィッシャー344ラットの化学的に誘導された神経膠腫に由来する。N-エチル-N-ニトロソウレア(ENU)の経胎盤投与により発生したRG2神経膠腫は、浸潤性増殖パターン、高い分裂指数、未分化な形態から未分化神経膠腫に分類される。これらの腫瘍は、in vivoで一貫した致死性を示し、有意な免疫反応を惹起することなく同種宿主で増殖する能力で注目されている。このように免疫原性が低いことから、RG2は膠芽腫様腫瘍の研究や免疫寛容な環境での実験的治療法の試験に理想的なモデルとなっている。
RG2神経膠腫細胞は、急速な増殖、浸潤能、ゲノム変化など、高悪性度神経膠腫に典型的な特徴を示す。CDKN2Aのような癌抑制遺伝子の欠損、PDGF、Ras、IGFシグナル伝達を含む経路の調節異常が研究により強調されている。この細胞株はin vitroでは未分化の紡錘形細胞として増殖し、頭蓋内に移植されると腫瘍形成能を維持し、正常脳組織へのびまん性浸潤を示し、ヒトの膠芽腫の挙動を模倣する。
この細胞株は、化学療法、放射線療法、遺伝子療法、免疫療法を含む様々な治療アプローチの有効性を評価する前臨床研究に広く利用されてきた。RG2神経膠腫は、対流促進送達(CED)のような新しい薬物送達法を試験したり、神経膠腫における血液脳関門破壊の機序を調べるのに特に有用である。病理組織学的および分子学的にヒト膠芽腫と類似していることから、トランスレーショナル神経腫瘍学における有用性が強調される。
- ティッシュ
- 脳
- 病気
- ラット悪性神経膠腫
- 用途
- 3D細胞培養、神経科学
- 同義語
- RG-2
- Rat Glioma-2
- D74
- D74-RG2
02分類
- 生物
- ネズミ
- セックス
- 未指定
- 成長特性
- アドヘレント
- バイオセーフティレベル
- 1
03特徴
- 形態学
- グリア
- 腫瘍形成性
- CDフィッシャーラットの場合
04識別子
- 引用
- RG2 (Cytion カタログ番号 300649)
- NCBI 納税者番号
- 10116
- セロサウルス
- CVCL_3581
05取り扱いと飼育
- 培地
- DMEM、w:4.5g/Lグルコース、w:4mM L-グルタミン、w:3.7g/L NaHCO3、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム(Cytion品番820300a)
- 培養雰囲気
37℃、5%CO2、加湿雰囲気。
- サプリメント
- 培地に10% FBSを加える
- 解離試薬
- アキュターゼ
- 継代培養
- 接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
- 解凍と培養
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06品質管理と凍結保存
- 無菌性
マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。
細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。
- 凍結培地
- 凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
- 保管条件
長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。
- 配送条件
凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。
07寄付者
- 品種/亜種
- フィッシャー344
- ドナーの年齢
- 妊娠20日後
08法務・安全
- 安全上の注意事項
- 将来の融解のためにクライオバイアルを液体窒素に保存する場合、厳格な安全対策を遵守することが必須である。適切な保護手袋と保護衣は不可欠であり、液体窒素タンクへの凍結サンプルの移動中または液体窒素タンクからの凍結サンプルの移動中には、フェイスマスクまたは安全ゴーグルの使用が義務付けられている。これは、凍結試料を取り出す際に、凍結試料が爆発し、鋭利な破片が飛び散って怪我をするリスクを軽減するためである。
- 保証
サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および/または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。
詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。
- 物質移転契約書の締結が必要
- はい
