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RG2
Tissue
Cerebro
Disease
Glioma maligno en ratas
Synonyms
RG-2, Rat Glioma-2, D74, D74-RG2

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RG2

Cell line · Product number 300649

The RG2 cell line is derived from a chemically induced glioma in Fischer 344 rats. Generated via transplacental administration of N-ethyl-N-nitrosourea (E...

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  • CoA
1

01General information

Description

La línea celular RG2 se deriva de un glioma inducido químicamente en ratas Fischer 344. Generados mediante la administración transplacentaria de N-etil-N-nitrosourea (ENU), los gliomas RG2 se clasifican como gliomas anaplásicos debido a su patrón de crecimiento invasivo, su alto índice mitótico y su morfología indiferenciada. Estos tumores se caracterizan por su letalidad constante in vivo y su capacidad para crecer en huéspedes singénicos sin provocar una respuesta inmunitaria significativa. Esta baja inmunogenicidad convierte a RG2 en un modelo ideal para estudiar tumores similares al glioblastoma y probar terapias experimentales en entornos inmunocompetentes.

Las células del glioma RG2 presentan características típicas de los gliomas de alto grado, entre ellas la rápida proliferación, la capacidad invasiva y las alteraciones genómicas. Diversos estudios han destacado la pérdida de genes supresores de tumores, como el CDKN2A, junto con la desregulación de vías de señalización que involucran al PDGF, Ras e IGF. La línea celular crece in vitro como células indiferenciadas de forma fusiforme, manteniendo su potencial tumorigénico cuando se implantan intracranealmente, donde muestran una invasión difusa en el tejido cerebral normal, imitando el comportamiento del glioblastoma humano.

Esta línea celular se ha utilizado ampliamente en la investigación preclínica para evaluar la eficacia de diversos enfoques terapéuticos, entre ellos la quimioterapia, la radioterapia, la terapia génica y la inmunoterapia. Los gliomas RG2 son particularmente valiosos para probar nuevos métodos de administración de fármacos, como la administración mejorada por convección (CED), y para investigar los mecanismos de alteración de la barrera hematoencefálica en los gliomas. Su parecido histopatológico y molecular con los glioblastomas humanos subraya su utilidad en la neurooncología traslacional.

Tissue
Cerebro
Disease
Glioma maligno en ratas
Applications
Cultivo celular en 3D, Neurociencia
Synonyms
  • RG-2
  • Rat Glioma-2
  • D74
  • D74-RG2

02Classification

Organism
Rat
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Glial
Tumourigenic
Sí, en ratas CD Fischer

04Identifiers

Citation
RG2 (número de catálogo de Cytion 300649)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_3581

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v: 4,5 g/L de glucosa, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sodio (número de artículo de Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

Supplements
Añade al medio un 10 % de FBS
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Freeze medium
Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
Storage conditions

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Shipping conditions

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

07Donor

Breed / subspecies
Fischer 344
Donor age
20 días después de la gestación