Премини към съдържанието
RG2
Тъкан
Мозък
Заболяване
Малигнен глиом при плъхове
Синоними
RG-2, Rat Glioma-2, D74, D74-RG2

Документи

RG2

Cell line · Номер на продукта 300649

The RG2 cell line is derived from a chemically induced glioma in Fischer 344 rats. Generated via transplacental administration of N-ethyl-N-nitrosourea (E...

€430.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия RG2 е получена от химически индуциран глиом при плъхове Fischer 344. Генерирани чрез трансплацентарно приложение на N-етил-N-нитрозокарбамид (ENU), глиомите RG2 се класифицират като анапластични глиоми поради инвазивния си модел на растеж, висок митотичен индекс и недиференцирана морфология. Тези тумори се отличават с постоянната си смъртност in vivo и способността си да растат в сингенни носители, без да предизвикват значителен имунен отговор. Тази ниска имуногенност прави RG2 идеален модел за изследване на глиобластоподобни тумори и тестване на експериментални терапии в имунокомпетентни условия.

Глиомните клетки RG2 притежават характеристики, типични за високостепенните глиоми, включително бърза пролиферация, инвазивен капацитет и геномни промени. Проучванията подчертават загубата на туморни супресорни гени като CDKN2A, както и дисрегулирани пътища, включващи PDGF, Ras и IGF сигнализация. Клетъчната линия расте като недиференцирани вретеновидни клетки in vitro, като запазва туморогенния си потенциал при имплантиране интракраниално, където показва дифузна инвазия в нормалната мозъчна тъкан, имитирайки поведението на човешкия глиобластом.

Тази клетъчна линия е широко използвана в предклинични изследвания за оценка на ефикасността на различни терапевтични подходи, включително химиотерапия, радиотерапия, генна терапия и имунотерапия. Глиомите RG2 са особено ценни за тестване на нови методи за доставяне на лекарства, като например доставянето с конвекция (CED), и за изследване на механизмите на нарушаване на кръвно-мозъчната бариера при глиомите. Хистопатологичното и молекулярното сходство с човешките глиобластоми подчертава полезността им в транслационната невроонкология.

Тъкан
Мозък
Заболяване
Малигнен глиом при плъхове
Приложения
3D клетъчна култура, Неврология
Синоними
  • RG-2
  • Rat Glioma-2
  • D74
  • D74-RG2

02Класификация

Организъм
Плъх
Секс
Не е посочено
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Глиален
Туморогенен
Да, при плъхове CD Fischer

04Идентификатори

Източник
RG2 (каталожен номер 300649 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10116
Целозавър
CVCL_3581

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Порода / подвид
Fischer 344
Възраст на донора
20 дни след бременността