Vai al contenuto
RG2
Tessuto
Cervello
Malattia
Glioma maligno di ratto
Sinonimi
RG-2, Rat Glioma-2, D74, D74-RG2

Documenti

RG2

Cell line · Codice prodotto 300649

The RG2 cell line is derived from a chemically induced glioma in Fischer 344 rats. Generated via transplacental administration of N-ethyl-N-nitrosourea (E...

€430.00IVA e spese di spedizione escluse
Disponibile
Lotto
Consigliati (partita più recente)
  • CoA
1

01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare RG2 è derivata da un glioma indotto chimicamente in ratti Fischer 344. Generati attraverso la somministrazione transplacentare di N-etil-N-nitrosourea (ENU), i gliomi RG2 sono classificati come gliomi anaplastici a causa del loro modello di crescita invasivo, dell'elevato indice mitotico e della morfologia indifferenziata. Questi tumori si distinguono per la loro costante letalità in vivo e per la loro capacità di crescere in ospiti singenici senza suscitare una risposta immunitaria significativa. Questa bassa immunogenicità rende l'RG2 un modello ideale per studiare i tumori simili al glioblastoma e testare terapie sperimentali in ambienti immunocompetenti.

Le cellule di glioma RG2 presentano caratteristiche tipiche dei gliomi di alto grado, tra cui rapida proliferazione, capacità invasiva e alterazioni genomiche. Gli studi hanno evidenziato la perdita di geni soppressori del tumore, come CDKN2A, e la disregolazione delle vie di segnalazione di PDGF, Ras e IGF. La linea cellulare cresce in vitro come cellule indifferenziate a forma di fuso, mantenendo il suo potenziale tumorale quando viene impiantata a livello intracranico, dove mostra un'invasione diffusa nel tessuto cerebrale normale, imitando il comportamento del glioblastoma umano.

Questa linea cellulare è stata ampiamente utilizzata nella ricerca preclinica per valutare l'efficacia di vari approcci terapeutici, tra cui chemioterapia, radioterapia, terapia genica e immunoterapia. I gliomi RG2 sono particolarmente utili per testare nuovi metodi di somministrazione di farmaci, come la somministrazione potenziata dalla convezione (CED), e per studiare i meccanismi di interruzione della barriera emato-encefalica nei gliomi. La somiglianza istopatologica e molecolare con i glioblastomi umani ne sottolinea l'utilità nella neuro-oncologia traslazionale.

Tessuto
Cervello
Malattia
Glioma maligno di ratto
Applicazioni
coltura cellulare 3D, Neuroscienze
Sinonimi
  • RG-2
  • Rat Glioma-2
  • D74
  • D74-RG2

02Classificazione

Organismo
Ratto
Sesso
Non specificato
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Gliale
Tumorigenico
Sì, nei ratti CD Fischer

04Identificatori

Riferimento bibliografico
RG2 (numero di catalogo Cytion 300649)
Codice fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_3581

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Razza / sottospecie
Fischer 344
Età dei donatori
20 giorni dopo la gestazione