الانتقال إلى المحتوى
RG2
الأنسجة
الدماغ
المرض
الورم الدبقي الخبيث في الفئران
المرادفات
RG-2, Rat Glioma-2, D74, D74-RG2

المستندات

RG2

Cell line · رقم المنتج 300649

The RG2 cell line is derived from a chemically induced glioma in Fischer 344 rats. Generated via transplacental administration of N-ethyl-N-nitrosourea (E...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

تم اشتقاق خط الخلايا RG2 من ورم دبقي مستحث كيميائياً في فئران فيشر 344. تم توليد الأورام الدبقية RG2 عن طريق الحقن عبر المشيمة بمادة ن-إيثيل-نيتروسوريا (ENU)، وتصنف الأورام الدبقية RG2 كأورام دبقية غير متمايزة بسبب نمط نموها الغازي ومؤشر الانقسام الانقسامي المرتفع ومورفولوجيتها غير المتمايزة. وتتميز هذه الأورام بفتكها المستمر في الجسم الحي وقدرتها على النمو في العوائل المتجانسة دون إثارة استجابة مناعية كبيرة. هذه المناعة المنخفضة تجعل من RG2 نموذجًا مثاليًا لدراسة الأورام الشبيهة بالورم الدبقي واختبار العلاجات التجريبية في البيئات المناعية.

تُظهر خلايا الورم الدبقي RG2 خصائص نموذجية للأورام الدبقية عالية الدرجة، بما في ذلك الانتشار السريع والقدرة على التوغل والتغيرات الجينومية. وقد سلطت الدراسات الضوء على فقدان الجينات الكابتة للورم مثل CDKN2A، إلى جانب المسارات غير المنظمة التي تتضمن إشارات PDGF وRas وIGF. ينمو الخط الخلوي كخلايا مغزلية غير متمايزة الشكل في المختبر، مع الحفاظ على قدرتها على التكاثر الورمي عند زرعها داخل الجمجمة، حيث تظهر غزوًا منتشرًا في أنسجة المخ الطبيعية، مما يحاكي سلوك الورم الأرومي الدبقي البشري.

وقد استُخدم هذا الخط الخلوي على نطاق واسع في الأبحاث قبل السريرية لتقييم فعالية مختلف الأساليب العلاجية، بما في ذلك العلاج الكيميائي والعلاج الإشعاعي والعلاج الجيني والعلاج المناعي. تُعد الأورام الدبقية RG2 ذات قيمة خاصة لاختبار طرق توصيل الأدوية الجديدة، مثل التوصيل المعزز بالحمل الحراري (CED)، وللتحقيق في آليات تعطيل الحاجز الدموي الدماغي في الأورام الدبقية. يؤكد تشابهها النسيجي والجزيئي مع الأورام الأرومية الدبقية البشرية على فائدتها في علم الأورام العصبية الانتقالية.

الأنسجة
الدماغ
المرض
الورم الدبقي الخبيث في الفئران
التطبيقات
زراعة الخلايا ثلاثية الأبعاد، علم الأعصاب
المرادفات
  • RG-2
  • Rat Glioma-2
  • D74
  • D74-RG2

02التصنيف

كائن حي
الجرذ
الجنس
غير محدد
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
جليلي
مُسبِّب للأورام
نعم، في فئران CD فيشر

04المعرّفات

المرجع
RG2 (الرقم الكتالوجي لسيتيون 300649)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10116
سيلوصور
CVCL_3581

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

السلالة / النوع الفرعي
فيشر 344
عمر المتبرع
بعد 20 يومًا من الحمل