Przejdź do treści
RG2
Chusteczka
Mózg
Choroba
Glejak złośliwy szczura
Synonimy
RG-2, Rat Glioma-2, D74, D74-RG2

Dokumenty

RG2

Cell line · Numer produktu 300649

The RG2 cell line is derived from a chemically induced glioma in Fischer 344 rats. Generated via transplacental administration of N-ethyl-N-nitrosourea (E...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa RG2 pochodzi z glejaka indukowanego chemicznie u szczurów Fischer 344. Wytworzone przez przezłożyskowe podanie N-etylo-N-nitrozomocznika (ENU), glejaki RG2 są klasyfikowane jako glejaki anaplastyczne ze względu na ich inwazyjny wzór wzrostu, wysoki indeks mitotyczny i niezróżnicowaną morfologię. Guzy te wyróżniają się stałą śmiertelnością in vivo i zdolnością do wzrostu u syngenicznych gospodarzy bez wywoływania znaczącej odpowiedzi immunologicznej. Ta niska immunogenność sprawia, że RG2 jest idealnym modelem do badania guzów podobnych do glejaka i testowania eksperymentalnych terapii w warunkach immunokompetentnych.

Komórki glejaka RG2 wykazują cechy typowe dla glejaków o wysokim stopniu złośliwości, w tym szybką proliferację, zdolność do inwazji i zmiany genomowe. Badania wykazały utratę genów supresorowych nowotworu, takich jak CDKN2A, wraz z rozregulowanymi szlakami obejmującymi sygnalizację PDGF, Ras i IGF. Linia komórkowa rośnie jako niezróżnicowane komórki w kształcie wrzeciona in vitro, zachowując swój potencjał nowotworowy po wszczepieniu wewnątrzczaszkowym, gdzie wykazują rozproszoną inwazję do normalnej tkanki mózgowej, naśladując zachowanie ludzkiego glejaka.

Ta linia komórkowa była szeroko wykorzystywana w badaniach przedklinicznych w celu oceny skuteczności różnych podejść terapeutycznych, w tym chemioterapii, radioterapii, terapii genowej i immunoterapii. Glejaki RG2 są szczególnie cenne do testowania nowych metod dostarczania leków, takich jak dostarczanie wspomagane konwekcją (CED), oraz do badania mechanizmów zaburzeń bariery krew-mózg w glejakach. Ich histopatologiczne i molekularne podobieństwo do ludzkich glejaków podkreśla ich przydatność w neuro-onkologii translacyjnej.

Chusteczka
Mózg
Choroba
Glejak złośliwy szczura
Zastosowania
hodowla komórkowa 3D, Neuronauka
Synonimy
  • RG-2
  • Rat Glioma-2
  • D74
  • D74-RG2

02Klasyfikacja

Organizm
Szczur
Seks
Nieokreślone
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Glej
Nowotworotwórczy
Tak, u szczurów CD Fischer

04Identyfikatory

Źródło
RG2 (numer katalogowy Cytion 300649)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_3581

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Rasa / podgatunek
Fischer 344
Wiek dawcy
20 dni po ciąży