Μετάβαση στο περιεχόμενο
RG2
Ιστός
Εγκέφαλος
Ασθένεια
Κακοήθες γλοίωμα αρουραίου
Συνώνυμα
RG-2, Rat Glioma-2, D74, D74-RG2

Έγγραφα

RG2

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300649

The RG2 cell line is derived from a chemically induced glioma in Fischer 344 rats. Generated via transplacental administration of N-ethyl-N-nitrosourea (E...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά RG2 προέρχεται από χημικά επαγόμενο γλοίωμα σε αρουραίους Fischer 344. Τα γλοιώματα RG2 που δημιουργήθηκαν μέσω διαπλακουντιακής χορήγησης Ν-αιθυλ-Ν-νιτροσουρίας (ENU), ταξινομούνται ως αναπλαστικά γλοιώματα λόγω του διεισδυτικού προτύπου ανάπτυξής τους, του υψηλού μιτωτικού δείκτη και της αδιαφοροποίητης μορφολογίας τους. Αυτοί οι όγκοι είναι αξιοσημείωτοι για τη συνεπή θνησιμότητά τους in vivo και την ικανότητά τους να αναπτύσσονται σε συγγενείς ξενιστές χωρίς να προκαλούν σημαντική ανοσολογική απόκριση. Αυτή η χαμηλή ανοσογονικότητα καθιστά τον RG2 ιδανικό μοντέλο για τη μελέτη όγκων που μοιάζουν με γλοιοβλάστωμα και τη δοκιμή πειραματικών θεραπειών σε ανοσοκατασταλμένα περιβάλλοντα.

Τα κύτταρα γλοιώματος RG2 παρουσιάζουν χαρακτηριστικά τυπικά των γλοιωμάτων υψηλού βαθμού, συμπεριλαμβανομένου του ταχέως πολλαπλασιασμού, της διεισδυτικής ικανότητας και των γονιδιωματικών αλλοιώσεων. Μελέτες έχουν αναδείξει την απώλεια ογκοκατασταλτικών γονιδίων όπως το CDKN2A, μαζί με απορρυθμισμένα μονοπάτια που περιλαμβάνουν τη σηματοδότηση PDGF, Ras και IGF. Η κυτταρική σειρά αναπτύσσεται ως αδιαφοροποίητα ατρακτοειδή κύτταρα in vitro, διατηρώντας το καρκινικό δυναμικό τους όταν εμφυτεύονται ενδοκρανιακά, όπου εμφανίζουν διάχυτη διείσδυση σε φυσιολογικό εγκεφαλικό ιστό, μιμούμενα τη συμπεριφορά του ανθρώπινου γλοιοβλαστώματος.

Αυτή η κυτταρική σειρά έχει χρησιμοποιηθεί εκτενώς στην προκλινική έρευνα για την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας διαφόρων θεραπευτικών προσεγγίσεων, συμπεριλαμβανομένης της χημειοθεραπείας, της ακτινοθεραπείας, της γονιδιακής θεραπείας και της ανοσοθεραπείας. Τα γλοιώματα RG2 είναι ιδιαίτερα πολύτιμα για τη δοκιμή νέων μεθόδων χορήγησης φαρμάκων, όπως η χορήγηση με συναγωγή (CED), και για τη διερεύνηση των μηχανισμών διαταραχής του αιματοεγκεφαλικού φραγμού στα γλοιώματα. Η ιστοπαθολογική και μοριακή τους ομοιότητα με τα ανθρώπινα γλοιοβλαστώματα υπογραμμίζει τη χρησιμότητά τους στη μεταφραστική νευρο-ογκολογία.

Ιστός
Εγκέφαλος
Ασθένεια
Κακοήθες γλοίωμα αρουραίου
Εφαρμογές
3D κυτταρική καλλιέργεια, Νευροεπιστήμη
Συνώνυμα
  • RG-2
  • Rat Glioma-2
  • D74
  • D74-RG2

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Αρουραίος
Σεξ
Μη καθορισμένο
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Γλοιώδες
Ογκογόνος
Ναι, σε αρουραίους CD Fischer

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
RG2 (αριθμός καταλόγου Cytion 300649)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10116
Κελλοσαύρος
CVCL_3581

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

07Δωρητής

Φυλή / υποείδος
Fischer 344
Ηλικία δωρητή
20 ημέρες μετά την κύηση