Tartalomra ugrás
SK-N-LO
Szövet
Agy
Betegség
Primitív neuroektodermális tumor
Áttétes hely
Csontvelő
Szinonimák
SK-N-L0, SKN-LO, SKNLO

Dokumentumok

SK-N-LO

Cell line · Termékszám 300400

The SK-N-LO cell line is a human neuroblastoma cell line used in research to study neuroblastoma as well as mechanisms of apoptosis and cancer signaling p...

€800.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
1

01Általános információk

Leírás

Az SK-N-LO sejtvonal egy humán neuroblastoma sejtvonal, amelyet a kutatásban a neuroblastoma, valamint az apoptózis és a rákos jelátviteli útvonalak mechanizmusainak tanulmányozására használnak. Primitív neuroektodermális tumor (PNET) sejtvonalnak is minősül, és az EWS-FLI1 fúziós gént hordozza, amely gyakran megtalálható a Ewing-szarkóma család tumoraiban (ESFT). Ez a fúziós gén egy kromoszómatranszlokáció eredménye, és kulcsszerepet játszik e tumorsejtek onkogén viselkedésében.

Az SK-N-LO sejtek különösen érzékenyek bizonyos onkogén jelátviteli utakat célzó inhibitorokra. A GLI-gátló GANT61 például bizonyítottan kaszpáz-független apoptózist indukál az SK-N-LO sejtekben. A GANT61 megzavarja a GLI1 és GLI2 által közvetített transzkripciót a Hedgehog (Hh) jelátviteli útvonalban, amely kritikus a sejtek túlélése és proliferációja szempontjából ebben a sejtvonalban. A GANT61-gyel kezelve az SK-N-LO sejtek apoptózissal összefüggő morfológiai változásokat mutatnak, mint például kromatin kondenzáció és magfragmentáció. Továbbá a GANT61 csökkenti az olyan fehérjék, mint a GLI2 és a survivin expresszióját, amelyek fontosak a sejtciklus progressziója és túlélése szempontjából, miközben növeli a p21, egy ciklinfüggő kináz inhibitor expresszióját.

Ezenkívül az SK-N-LO sejteket az opioid receptorok jelátvitelének tanulmányozására is felhasználták. Ezeket a sejteket úgy alakították ki, hogy a μ-opioid receptort expresszálják, így értékes modellként szolgálnak az opioidok által kiváltott analgézia és az intracelluláris jelátviteli útvonalak közötti kölcsönhatás vizsgálatára. Vizsgálatok például kimutatták, hogy a morfium a PI3Kγ útvonalon keresztül serkenti az Akt foszforilációt az SK-N-LO sejtekben, amely folyamatot a cAMP jelátvitellel lehet modulálni. Ez rávilágít az SK-N-LO sejtek sokoldalúságára mind a rákbiológia, mind a neurofarmakológia feltárásában.

Szövet
Agy
Betegség
Primitív neuroektodermális tumor
Áttétes hely
Csontvelő
Szinonimák
  • SK-N-L0
  • SKN-LO
  • SKNLO

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Kariotípus
Fenotípus gyakorisági termék: 0.00005

04Azonosítók

Hivatkozás
SK-N-LO (Cytion katalógusszám: 300400)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_4569

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion cikkszám: 820100a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 10% FBS-szel és 1% NEAA-val kell kiegészíteni
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
3–4 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
A kriokonzerváláshoz 50%-os alapközeget + 40% FBS + 10% DMSO-t vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100) használunk, amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regeneráció fokozása és a krioindukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Az adományozó életkora
10 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi