SK-N-LO

Buněčná linie SK-N-LO je lidská neuroblastomová buněčná linie, která se používá ve výzkumu neuroblastomu a také ke studiu mechanismů apoptózy a nádorových signálních drah. Je také klasifikována jako buněčná linie primitivního neuroektodermálního nádoru (PNET) a nese fúzní gen EWS-FLI1, který se běžně vyskytuje u nádorů rodiny Ewingova sarkomu (ESFT). Tento fúzní gen je výsledkem chromozomální translokace a hraje klíčovou roli v onkogenním chování těchto nádorových buněk.

Buňky SK-N-LO jsou obzvláště citlivé na některé inhibitory zaměřené na onkogenní signální dráhy. Bylo například prokázáno, že inhibitor GLI GANT61 vyvolává u buněk SK-N-LO apoptózu nezávislou na kaspáze. GANT61 narušuje transkripci zprostředkovanou GLI1 a GLI2 v signální dráze Hedgehog (Hh), která je u této buněčné linie rozhodující pro přežití a proliferaci buněk. Při léčbě přípravkem GANT61 vykazují buňky SK-N-LO morfologické změny spojené s apoptózou, jako je kondenzace chromatinu a fragmentace jader. GANT61 navíc snižuje expresi proteinů jako GLI2 a survivin, které jsou důležité pro progresi buněčného cyklu a přežití, a zároveň zvyšuje expresi p21, inhibitoru cyklin-dependentní kinázy.

Buňky SK-N-LO byly navíc využity ke studiu signalizace opioidních receptorů. Tyto buňky byly upraveny tak, aby exprimovaly μ-opioidní receptor, což z nich činí cenný model pro zkoumání interakce mezi analgezií vyvolanou opioidy a intracelulárními signálními drahami. Studie například ukázaly, že morfin stimuluje fosforylaci Akt v buňkách SK-N-LO prostřednictvím dráhy PI3Kγ, což je proces, který lze modulovat signalizací cAMP. To poukazuje na všestrannost buněk SK-N-LO při zkoumání biologie rakoviny i neurofarmakologie.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení