Skip to content
SK-N-LO
Tissue
สมอง
Disease
เนื้องอกประสาทชั้นนอกดั้งเดิม
Metastatic site
ไขกระดูก
Synonyms
SK-N-L0, SKN-LO, SKNLO

Documents

SK-N-LO

Cell line · Product number 300400

The SK-N-LO cell line is a human neuroblastoma cell line used in research to study neuroblastoma as well as mechanisms of apoptosis and cancer signaling p...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

สายพันธุ์เซลล์ SK-N-LO เป็นสายพันธุ์เซลล์เนื้องอกประสาทของมนุษย์ที่ใช้ในการวิจัยเพื่อศึกษาเนื้องอกประสาท รวมถึงกลไกของการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิสและเส้นทางสัญญาณมะเร็งนอกจากนี้ยังถูกจัดประเภทเป็นเซลล์ไลน์เนื้องอกประสาทชั้นนอกดั้งเดิม (PNET) และมีการรวมยีน EWS-FLI1 ซึ่งพบได้บ่อยในเนื้องอกตระกูล Ewing's sarcoma (ESFT) ยีนที่รวมกันนี้เกิดจากการเคลื่อนย้ายโครโมโซมและมีบทบาทสำคัญในพฤติกรรมก่อมะเร็งของเซลล์เนื้องอกเหล่านี้

เซลล์ SK-N-LO มีความไวเป็นพิเศษต่อสารยับยั้งบางชนิดที่มุ่งเป้าไปที่เส้นทางการส่งสัญญาณที่ก่อให้เกิดมะเร็ง ตัวอย่างเช่น สารยับยั้ง GLI ที่ชื่อว่า GANT61 ได้แสดงให้เห็นว่าสามารถกระตุ้นการตายของเซลล์แบบไม่พึ่งพาแคสเปสในเซลล์ SK-N-LO ได้ GANT61 ทำลายการถอดรหัสที่ควบคุมโดย GLI1 และ GLI2 ในเส้นทางการส่งสัญญาณ Hedgehog (Hh) ซึ่งมีความสำคัญต่อการอยู่รอดและการเพิ่มจำนวนของเซลล์ในสายพันธุ์นี้เมื่อเซลล์ SK-N-LO ได้รับการรักษาด้วย GANT61 จะเกิดการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาที่เกี่ยวข้องกับกระบวนการอะพอพโทซิส เช่น การจับตัวของโครมาตินและการแตกตัวของนิวเคลียส นอกจากนี้ GANT61 ยังลดการแสดงออกของโปรตีนอย่าง GLI2 และ survivin ซึ่งมีความสำคัญต่อการดำเนินของวัฏจักรเซลล์และการอยู่รอดของเซลล์ ขณะเดียวกันก็เพิ่มการแสดงออกของ p21 ซึ่งเป็นตัวยับยั้งไคเนสที่ขึ้นอยู่กับไซคลิน

นอกจากนี้ เซลล์ SK-N-LO ยังถูกนำมาใช้ในการศึกษาการส่งสัญญาณของตัวรับโอปิออยด์ เซลล์เหล่านี้ได้รับการดัดแปลงให้แสดงออกตัวรับ μ-opioid ทำให้เป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาปฏิสัมพันธ์ระหว่างการบรรเทาอาการปวดที่เกิดจากโอปิออยด์กับเส้นทางการส่งสัญญาณภายในเซลล์ตัวอย่างเช่น การศึกษาได้แสดงให้เห็นว่ามอร์ฟีนกระตุ้นการฟอสโฟรีเลชันของ Akt ในเซลล์ SK-N-LO ผ่านเส้นทาง PI3Kγ ซึ่งเป็นกระบวนการที่สามารถถูกปรับโดยสัญญาณ cAMP สิ่งนี้เน้นถึงความหลากหลายของเซลล์ SK-N-LO ในการสำรวจทั้งชีววิทยาของมะเร็งและเภสัชวิทยาทางระบบประสาท

Tissue
สมอง
Disease
เนื้องอกประสาทชั้นนอกดั้งเดิม
Metastatic site
ไขกระดูก
Synonyms
  • SK-N-L0
  • SKN-LO
  • SKNLO

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Karyotype
ความถี่ของฟีโนไทป์: 0.00005

04Identifiers

Citation
SK-N-LO (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300400)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_4569

05Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ NEAA 1%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
3 ถึง 4 x 104 เซลล์/ตารางเซนติเมตร
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้ 50% basal medium + 40% FBS + 10% DMSO หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
10 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน