Pereiti prie turinio
SK-N-LO
Audinys
Smegenys
Liga
Primityvus neuroektoderminis navikas
Metastazių vieta
Kaulų čiulpai
Sinonimai
SK-N-L0, SKN-LO, SKNLO

Dokumentai

SK-N-LO

Cell line · Prekės numeris 300400

The SK-N-LO cell line is a human neuroblastoma cell line used in research to study neuroblastoma as well as mechanisms of apoptosis and cancer signaling p...

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
1

01Bendra informacija

Aprašymas

SK-N-LO ląstelių linija - tai žmogaus neuroblastomos ląstelių linija, naudojama moksliniuose tyrimuose tiriant neuroblastomą, taip pat apoptozės mechanizmus ir vėžio signalinius kelius. Ji taip pat klasifikuojama kaip primityvaus neuroektoderminio naviko (PNET) ląstelių linija ir turi EWS-FLI1 sintezės geną, kuris dažniausiai aptinkamas Ewingo sarkomų šeimos navikuose (ESFT). Šis sintezės genas atsiranda dėl chromosominės translokacijos ir atlieka pagrindinį vaidmenį šių navikinių ląstelių onkogeninėje elgsenoje.

SK-N-LO ląstelės yra ypač jautrios tam tikriems inhibitoriams, veikiantiems onkogeninius signalų kelius. Pavyzdžiui, nustatyta, kad GLI inhibitorius GANT61 SK-N-LO ląstelėse sukelia nuo kaspazės nepriklausomą apoptozę. GANT61 sutrikdo GLI1 ir GLI2 medijuojamą transkripciją Hedgehog (Hh) signaliniame kelyje, kuris yra labai svarbus šios linijos ląstelių išgyvenimui ir dauginimuisi. Veikiant GANT61, SK-N-LO ląstelėse atsiranda morfologinių pokyčių, susijusių su apoptoze, pavyzdžiui, chromatino kondensacija ir branduolio fragmentacija. Be to, GANT61 sumažina tokių baltymų, kaip GLI2 ir survivinas, kurie yra svarbūs ląstelių ciklo progresavimui ir išlikimui, raišką, o ciklinų priklausomos kinazės inhibitoriaus p21 raišką padidina.

Be to, SK-N-LO ląstelės buvo panaudotos opioidinių receptorių signalizacijai tirti. Šios ląstelės buvo sukurtos taip, kad ekspresuotų μ-opioidinį receptorių, todėl jos yra vertingas modelis opioidų sukeliamos analgezijos ir viduląstelinių signalų kelių sąveikai tirti. Pavyzdžiui, tyrimai parodė, kad morfinas skatina Akt fosforilinimą SK-N-LO ląstelėse per PI3Kγ kelią, o šis procesas gali būti moduliuojamas cAMP signalais. Tai rodo SK-N-LO ląstelių universalumą tiriant ir vėžio biologiją, ir neurofarmakologiją.

Audinys
Smegenys
Liga
Primityvus neuroektoderminis navikas
Metastazių vieta
Kaulų čiulpai
Sinonimai
  • SK-N-L0
  • SKN-LO
  • SKNLO

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Kariotipas
Fenotipo dažnis Produktas: 0.00005

04Identifikatoriai

Nuoroda
SK-N-LO (Cytion katalogo numeris 300400)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_4569

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
3–4 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame 50 % bazinę terpę + 40 % FBS + 10 % DMSO arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Donoro amžius
10 metų
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių