SK-N-LO

La línea celular SK-N-LO es una línea celular de neuroblastoma humano utilizada en investigación para estudiar el neuroblastoma, así como los mecanismos de apoptosis y las vías de señalización del cáncer. También se clasifica como línea celular de tumor neuroectodérmico primitivo (PNET) y es portadora del gen de fusión EWS-FLI1, común en los tumores de la familia del sarcoma de Ewing (ESFT). Este gen de fusión es el resultado de una translocación cromosómica y desempeña un papel clave en el comportamiento oncogénico de estas células tumorales.

Las células SK-N-LO son especialmente sensibles a ciertos inhibidores dirigidos contra vías de señalización oncogénicas. Por ejemplo, se ha demostrado que el inhibidor de GLI GANT61 induce la apoptosis independiente de la caspasa en las células SK-N-LO. GANT61 interrumpe la transcripción mediada por GLI1 y GLI2 en la vía de señalización Hedgehog (Hh), que es crítica para la supervivencia y proliferación celular en esta línea celular. Cuando se tratan con GANT61, las células SK-N-LO presentan cambios morfológicos asociados a la apoptosis, como condensación de la cromatina y fragmentación nuclear. Además, GANT61 reduce la expresión de proteínas como GLI2 y survivina, importantes para la progresión del ciclo celular y la supervivencia, al tiempo que aumenta la expresión de p21, un inhibidor de la cinasa dependiente de ciclina.

Además, se han utilizado células SK-N-LO para estudiar la señalización del receptor opioide. Estas células han sido diseñadas para expresar el receptor μ-opioide, lo que las convierte en un modelo valioso para investigar la interacción entre la analgesia inducida por opioides y las vías de señalización intracelular. Por ejemplo, los estudios han demostrado que la morfina estimula la fosforilación de Akt en las células SK-N-LO a través de la vía PI3Kγ, un proceso que puede ser modulado por la señalización de AMPc. Esto pone de relieve la versatilidad de las células SK-N-LO para explorar tanto la biología del cáncer como la neurofarmacología.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía