SK-N-LO

خط الخلايا SK-N-LO هو خط خلايا الورم الأرومي العصبي البشري المستخدم في الأبحاث لدراسة الورم الأرومي العصبي وكذلك آليات موت الخلايا المبرمج ومسارات إشارات السرطان. ويُصنف أيضاً كخط خلوي لورم الأديم العصبي البدائي (PNET) ويحمل جين الاندماج EWS-FLI1 الذي يوجد عادةً في أورام عائلة ساركوما إيوينج (ESFT). وينتج هذا الجين الاندماجي من انتقال كروموسومي ويلعب دورًا رئيسيًا في السلوك السرطاني لهذه الخلايا السرطانية.

تكون خلايا SK-N-LO حساسة بشكل خاص لبعض المثبطات التي تستهدف مسارات الإشارات الورمية. على سبيل المثال، ثبت أن مثبط GLI GANT61 يحفز موت الخلايا المبرمج المستقل عن كاسباز في خلايا SK-N-LO. يعرقل GANT61 النسخ بوساطة GLI1 وGLI2 في مسار إشارات Hedgehog (Hh)، وهو أمر بالغ الأهمية لبقاء الخلايا وتكاثرها في هذا الخط الخلوي. عند معالجتها ب GANT61، تُظهر خلايا SK-N-LO تغيرات مورفولوجية مرتبطة بموت الخلايا المبرمج، مثل التكثيف الكروماتيني والتفتت النووي. وعلاوة على ذلك، يقلل GANT61 من التعبير عن بروتينات مثل GLI2 و survivin، وهي بروتينات مهمة لتقدم دورة الخلية وبقائها، بينما يزيد من التعبير عن p21، وهو مثبط كيناز يعتمد على السيكلين.

بالإضافة إلى ذلك، تم استخدام خلايا SK-N-LO لدراسة إشارات المستقبلات الأفيونية. وقد تمت هندسة هذه الخلايا للتعبير عن مستقبلات الأفيونيات μ، مما يجعلها نموذجًا قيّمًا لدراسة التفاعل بين التسكين الناجم عن الأفيونيات ومسارات الإشارات داخل الخلايا. على سبيل المثال، أظهرت الدراسات أن المورفين يحفز فسفرة Akt في خلايا SK-N-LO عبر مسار PI3Kγ، وهي عملية يمكن تعديلها عن طريق إشارات cAMP. وهذا يسلط الضوء على تنوع خلايا SK-N-LO في استكشاف كل من بيولوجيا السرطان وعلم الأدوية العصبية.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان