SK-N-LO

A linha celular SK-N-LO é uma linha celular de neuroblastoma humano utilizada em investigação para estudar o neuroblastoma, bem como os mecanismos de apoptose e as vias de sinalização do cancro. É também classificada como uma linha celular de tumor neuroectodérmico primitivo (PNET) e é portadora do gene de fusão EWS-FLI1, comummente encontrado nos tumores da família do sarcoma de Ewing (ESFT). Este gene de fusão resulta de uma translocação cromossómica e desempenha um papel fundamental no comportamento oncogénico destas células tumorais.

As células SK-N-LO são particularmente sensíveis a certos inibidores que visam as vias de sinalização oncogénicas. Por exemplo, o inibidor de GLI GANT61 demonstrou induzir apoptose independente de caspase nas células SK-N-LO. O GANT61 interrompe a transcrição mediada por GLI1 e GLI2 na via de sinalização Hedgehog (Hh), que é crítica para a sobrevivência e proliferação celular nesta linha celular. Quando tratadas com GANT61, as células SK-N-LO exibem alterações morfológicas associadas à apoptose, como a condensação da cromatina e a fragmentação nuclear. Além disso, o GANT61 reduz a expressão de proteínas como GLI2 e survivin, que são importantes para a progressão e sobrevivência do ciclo celular, enquanto aumenta a expressão de p21, um inibidor da quinase dependente de ciclina.

Além disso, as células SK-N-LO foram utilizadas para estudar a sinalização dos receptores opióides. Estas células foram concebidas para expressar o recetor μ-opióide, o que as torna um modelo valioso para investigar a interação entre a analgesia induzida por opióides e as vias de sinalização intracelular. Por exemplo, estudos demonstraram que a morfina estimula a fosforilação da Akt nas células SK-N-LO através da via PI3Kγ, um processo que pode ser modulado pela sinalização do AMPc. Isto realça a versatilidade das células SK-N-LO na exploração da biologia do cancro e da neurofarmacologia.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia