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SK-N-LO
Tissue
大腦
Disease
原始神經外胚層腫瘤
Metastatic site
骨髓
Synonyms
SK-N-L0, SKN-LO, SKNLO

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SK-N-LO

Cell line · Product number 300400

The SK-N-LO cell line is a human neuroblastoma cell line used in research to study neuroblastoma as well as mechanisms of apoptosis and cancer signaling p...

US$800.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description

SK-N-LO 細胞系是一種人類神經母細胞瘤細胞系,常用於研究神經母細胞瘤,以及細胞凋亡機制與癌症訊號傳導路徑。 該細胞系亦被歸類為原始神經外胚層腫瘤(PNET)細胞系,並攜帶 EWS-FLI1 融合基因,此基因常見於尤因氏肉瘤家族腫瘤(ESFT)中。此融合基因源於染色體轉位,並在這些腫瘤細胞的致癌行為中扮演關鍵角色。

SK-N-LO 細胞對某些針對致癌訊號傳導路徑的抑制劑特別敏感。例如,研究顯示 GLI 抑制劑 GANT61 可在 SK-N-LO 細胞中誘導不依賴於半胱天冬酶的凋亡。 GANT61 會干擾 Hedgehog(Hh)訊號傳導路徑中由 GLI1 和 GLI2 介導的轉錄過程,而該路徑對於此細胞系的細胞存活與增殖至關重要。經 GANT61 處理後,SK-N-LO 細胞會出現與凋亡相關的形態學變化,例如染色質凝集與核碎裂。 此外,GANT61 會降低 GLI2 和 survivin 等蛋白質的表達(這些蛋白質對細胞週期進展和生存至關重要),同時增加細胞周期依賴性激酶抑制劑 p21 的表達。

此外,SK-N-LO 細胞亦被用於研究阿片受體訊號傳導。這些細胞經基因工程改造後可表達 μ-阿片受體,使其成為探究阿片誘導性鎮痛與細胞內訊號傳導路徑之間相互作用的寶貴模型。 舉例而言,研究顯示嗎啡會透過 PI3Kγ 途徑刺激 SK-N-LO 細胞中的 Akt 磷酸化,而此過程可受 cAMP 訊號傳導調控。這凸顯了 SK-N-LO 細胞在探索癌症生物學與神經藥理學方面的多功能性。

Tissue
大腦
Disease
原始神經外胚層腫瘤
Metastatic site
骨髓
Synonyms
  • SK-N-L0
  • SKN-LO
  • SKNLO

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
上皮樣
Karyotype
表型頻率積:0.00005

04Identifiers

Citation
SK-N-LO(Cytion 型號 300400)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_4569

05Handling and culture

Culture medium
EMEM(MEM Eagle),含 2 mM L-谷氨醯胺,含 2.2 g/L NaHCO₃,含 EBSS(Cytion 產品編號 820100a)
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Supplements
在培養基中加入 10% FBS 和 1% NEAA
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
Seeding density
3 至 4 × 10⁴ 個細胞/cm²
Fluid renewal
每週 2 至 3 次
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用 50% 基礎培養基 + 40% 胎牛血清 (FBS) + 10% 二甲基亞砜 (DMSO),或 CM-1(Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提高細胞存活率並減輕冷凍引起的應激。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

07Donor

Donor age
10年
Ethnicity
高加索人