
- Kude
- Aju
- Haigus
- Primitiivne neuroektodermiline kasvaja
- Metastaaside asukoht
- Luuüdi
- Sünonüümid
- SK-N-L0, SKN-LO, SKNLO
Dokumendid
SK-N-LO
Cell line · Toote number 300400
The SK-N-LO cell line is a human neuroblastoma cell line used in research to study neuroblastoma as well as mechanisms of apoptosis and cancer signaling p...
Kohandamine / Soovitused
- SK-N-LOCell line€800.00
Soovitatav (värskeim partii)
01Üldine teave
- Kirjeldus
SK-N-LO rakuliin on inimese neuroblastoomi rakuliin, mida kasutatakse neuroblastoomi ning apoptoosi ja vähi signaaliradade mehhanismide uurimiseks. See liigitatakse ka primitiivse neuroektodermise kasvaja (PNET) rakuliiniks ja kannab EWS-FLI1 fusioonigeeni, mida tavaliselt leidub Ewingi sarkoomi perekonna kasvajates (ESFT). See fusioonigeen tuleneb kromosomaalsest translokatsioonist ja mängib võtmerolli nende kasvajarakkude onkogeenses käitumises.
SK-N-LO rakud on eriti tundlikud teatavate onkogeensetele signaaliradadele suunatud inhibiitorite suhtes. Näiteks on näidatud, et GLI inhibiitor GANT61 kutsub SK-N-LO rakkudes esile kaspaasist sõltumatu apoptoosi. GANT61 häirib GLI1 ja GLI2 vahendatud transkriptsiooni Hedgehogi (Hh) signaaliteel, mis on selles rakuliinis rakkude ellujäämise ja proliferatsiooni jaoks kriitilise tähtsusega. GANT61-ga ravimisel ilmnevad SK-N-LO rakkudel apoptoosiga seotud morfoloogilised muutused, nagu kromatiini kondenseerumine ja tuuma fragmenteerumine. Lisaks vähendab GANT61 selliste valkude nagu GLI2 ja survivin, mis on olulised rakutsükli progresseerumise ja ellujäämise seisukohalt, ekspressiooni, suurendades samal ajal tsükliinist sõltuva kinaasi inhibiitori p21 ekspressiooni.
Lisaks on SK-N-LO rakke kasutatud opioidiretseptorite signalisatsiooni uurimiseks. Need rakud on loodud ekspresseerima μ-opioidiretseptorit, mis muudab need väärtuslikuks mudeliks opioididest põhjustatud analgeesia ja rakusiseste signaaliradade vahelise koostoime uurimiseks. Näiteks on uuringud näidanud, et morfiin stimuleerib SK-N-LO rakkudes Akt fosforüülimist PI3Kγ raja kaudu, mida saab moduleerida cAMP-signalisatsiooniga. See rõhutab SK-N-LO rakkude mitmekülgsust nii vähibioloogia kui ka neurofarmakoloogia uurimisel.
- Kude
- Aju
- Haigus
- Primitiivne neuroektodermiline kasvaja
- Metastaaside asukoht
- Luuüdi
- Sünonüümid
- SK-N-L0
- SKN-LO
- SKNLO
02Klassifikatsioon
- Organism
- Inimene
- Sugu
- Mees
- Kasvuvõime
- Järgija
- Bioloogilise ohutuse tase
- 1
03Omadused
- Morfoloogia
- Epiteelilaadsed
- Karyotüüp
- Fenotüübi sageduse toode: 0.00005
04Tunnused
- Viide
- SK-N-LO (Cytioni katalooginumber 300400)
- NCBI maksukood
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_4569
05Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
- Külvitihedus
- 3 kuni 4 x 104 rakku/cm2
- Vedeliku vahetus
- 2 kuni 3 korda nädalas
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüokonserveerimissöötmena kasutame 50% põhikeskkonda + 40% FBS + 10% DMSO ehk CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüoostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
07Annetaja
- Doonori vanus
- 10 aastat
- Etniline kuuluvus
- Kaukaasia
08Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Vajalik on materjalide üleandmise leping
- Jah






.jpg)
