- Tisu
- Otak
- Penyakit
- Tumor Neuroektodermal Primitif
- Lokasi metastasis
- Sumsum tulang
- Sinonim
- SK-N-L0, SKN-LO, SKNLO
Dokumen
SK-N-LO
Cell line · Nomor produk 300400
The SK-N-LO cell line is a human neuroblastoma cell line used in research to study neuroblastoma as well as mechanisms of apoptosis and cancer signaling p...
Penyesuaian / Rekomendasi
- SK-N-LOCell line€800.00
Direkomendasikan (stok terbaru)
01Informasi umum
- Deskripsi
Garis sel SK-N-LO adalah garis sel neuroblastoma manusia yang digunakan dalam penelitian untuk mempelajari neuroblastoma serta mekanisme apoptosis dan jalur pensinyalan kanker. Ini juga diklasifikasikan sebagai garis sel tumor neuroektodermal primitif (PNET) dan membawa gen fusi EWS-FLI1, yang umumnya ditemukan pada tumor keluarga sarkoma Ewing (ESFT). Gen fusi ini dihasilkan dari translokasi kromosom dan memainkan peran kunci dalam perilaku onkogenik sel tumor ini.
Sel SK-N-LO sangat sensitif terhadap penghambat tertentu yang menargetkan jalur pensinyalan onkogenik. Sebagai contoh, penghambat GLI GANT61 telah terbukti menginduksi apoptosis independen caspase dalam sel SK-N-LO. GANT61 mengganggu transkripsi yang dimediasi GLI1 dan GLI2 di jalur pensinyalan Hedgehog (Hh), yang sangat penting untuk kelangsungan hidup dan proliferasi sel di jalur sel ini. Ketika diobati dengan GANT61, sel SK-N-LO menunjukkan perubahan morfologi yang terkait dengan apoptosis, seperti kondensasi kromatin dan fragmentasi nuklir. Selain itu, GANT61 mengurangi ekspresi protein seperti GLI2 dan survivin, yang penting untuk perkembangan dan kelangsungan hidup siklus sel, sambil meningkatkan ekspresi p21, inhibitor kinase yang bergantung pada siklin.
Selain itu, sel SK-N-LO telah digunakan untuk mempelajari pensinyalan reseptor opioid. Sel-sel ini telah direkayasa untuk mengekspresikan reseptor μ-opioid, menjadikannya model yang berharga untuk menyelidiki interaksi antara analgesia yang diinduksi opioid dan jalur pensinyalan intraseluler. Sebagai contoh, penelitian telah menunjukkan bahwa morfin menstimulasi fosforilasi Akt dalam sel SK-N-LO melalui jalur PI3Kγ, sebuah proses yang dapat dimodulasi oleh pensinyalan cAMP. Hal ini menyoroti keserbagunaan sel SK-N-LO dalam mengeksplorasi biologi kanker dan neurofarmakologi.
- Tisu
- Otak
- Penyakit
- Tumor Neuroektodermal Primitif
- Lokasi metastasis
- Sumsum tulang
- Sinonim
- SK-N-L0
- SKN-LO
- SKNLO
02Klasifikasi
- Organisme
- Manusia
- Seks
- Laki-laki
- Sifat-sifat pertumbuhan
- Pengikut
- Tingkat keamanan hayati
- 1
03Karakteristik
- Morfologi
- Seperti epitel
- Kariotipe
- Produk Frekuensi Fenotipe: 0.00005
04Pengidentifikasi
- Referensi
- SK-N-LO (Nomor katalog Cytion 300400)
- Nomor Identifikasi Pajak NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_4569
05Penanganan dan budidaya
- Media kultur
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (nomor artikel Cytion 820100a)
- Suasana inkubasi
37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.
- Suplemen
- Lengkapi media dengan 10% FBS dan 1% NEAA
- Reagen disosiasi
- Accutase
- Perbanyakan sel
- Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
- Kepadatan penanaman
- 3 hingga 4 x 10⁴ sel/cm²
- Pergantian cairan
- 2 hingga 3 kali per minggu
- Pencairan dan pembiakan
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Pengendalian mutu dan kriopreservasi
- Kemandulan
Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.
Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.
- Media pembekuan
- Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan 50% media basal + 40% FBS + 10% DMSO, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
- Kondisi penyimpanan
Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.
- Ketentuan pengiriman
Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.
07Donatur
- Usia donor
- 10 tahun
- Etnis
- Kaukasia
08Hukum dan keselamatan
- Tindakan pencegahan keselamatan
- Ketika berencana menyimpan kriovial dalam nitrogen cair untuk pencairan di masa mendatang, Anda wajib mematuhi langkah-langkah keamanan yang ketat. Sarung tangan dan pakaian pelindung yang tepat sangat penting, dan penggunaan masker wajah atau kacamata pengaman diperlukan selama pemindahan sampel beku ke atau dari tangki nitrogen cair. Hal ini untuk mengurangi risiko cedera akibat potensi ledakan cryovial pada saat pemindahan, yang dapat mengakibatkan proyeksi fragmen tajam.
- Garansi
Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk
Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami
- Diperlukan Perjanjian Transfer Material
- Ya
.jpg)
