Gå direkt till innehållet
SK-N-LO
Vävnad
Hjärna
Sjukdom
Primitiv neuroektodermal tumör
Metastaseringsställe
Benmärg
Synonymer
SK-N-L0, SKN-LO, SKNLO

SK-N-LO

Cell line · Produktnummer 300400

The SK-N-LO cell line is a human neuroblastoma cell line used in research to study neuroblastoma as well as mechanisms of apoptosis and cancer signaling p...

€800.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
1

01Allmän information

Beskrivning

SK-N-LO-cellinjen är en human neuroblastomcellinje som används inom forskning för att studera neuroblastom samt mekanismer för apoptos och signalvägar för cancer. Den klassificeras också som en PNET-cellinje (primitive neuroectodermal tumor) och bär på fusionsgenen EWS-FLI1, som är vanligt förekommande i tumörer i Ewings sarkomfamilj (ESFT). Denna fusionsgen är resultatet av en kromosomal translokation och spelar en nyckelroll i det onkogena beteendet hos dessa tumörceller.

SK-N-LO-celler är särskilt känsliga för vissa hämmare som riktar in sig på onkogena signalvägar. Till exempel har GLI-hämmaren GANT61 visat sig inducera caspase-oberoende apoptos i SK-N-LO-celler. GANT61 stör GLI1- och GLI2-medierad transkription i Hedgehog (Hh)-signalvägen, som är avgörande för cellöverlevnad och proliferation i denna cellinje. När SK-N-LO-celler behandlas med GANT61 uppvisar de morfologiska förändringar som förknippas med apoptos, såsom kromatinförtätning och kärnfragmentering. Vidare minskar GANT61 uttrycket av proteiner som GLI2 och survivin, vilka är viktiga för cellcykelprogression och överlevnad, samtidigt som uttrycket av p21, en cyklinberoende kinashämmare, ökar.

Dessutom har SK-N-LO-celler använts för att studera opioidreceptorsignalering. Dessa celler har konstruerats för att uttrycka μ-opioidreceptorn, vilket gör dem till en värdefull modell för att undersöka samspelet mellan opioidinducerad analgesi och intracellulära signalvägar. Till exempel har studier visat att morfin stimulerar Akt-fosforylering i SK-N-LO-celler via PI3Kγ-vägen, en process som kan moduleras genom cAMP-signalering. Detta belyser SK-N-LO-cellernas mångsidighet när det gäller att utforska både cancerbiologi och neurofarmakologi.

Vävnad
Hjärna
Sjukdom
Primitiv neuroektodermal tumör
Metastaseringsställe
Benmärg
Synonymer
  • SK-N-L0
  • SKN-LO
  • SKNLO

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande
Karyotyp
Produkt för fenotypfrekvens: 0.00005

04Identifierare

Källa
SK-N-LO (Cytion katalognummer 300400)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_4569

05Hantering och odling

Odlingsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS och 1% NEAA
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
3 till 4 x 104 celler/cm2
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi 50% basalt medium + 40% FBS + 10% DMSO, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

07Donator

Donatorns ålder
10 år
Etnicitet
Kaukasisk