SK-N-LO

La línea celular SK-N-LO es una línea celular de neuroblastoma humano que se utiliza en la investigación para estudiar el neuroblastoma, así como los mecanismos de la apoptosis y las vías de señalización del cáncer. También se clasifica como una línea celular de tumor neuroectodérmico primitivo (PNET) y porta el gen de fusión EWS-FLI1, que se encuentra comúnmente en los tumores de la familia del sarcoma de Ewing (ESFT). Este gen de fusión es el resultado de una translocación cromosómica y desempeña un papel clave en el comportamiento oncogénico de estas células tumorales.

Las células SK-N-LO son particularmente sensibles a ciertos inhibidores dirigidos a las vías de señalización oncogénicas. Por ejemplo, se ha demostrado que el inhibidor de GLI, GANT61, induce la apoptosis independiente de la caspasa en las células SK-N-LO. El GANT61 interrumpe la transcripción mediada por GLI1 y GLI2 en la vía de señalización Hedgehog (Hh), la cual es fundamental para la supervivencia y la proliferación celular en esta línea celular. Cuando se tratan con GANT61, las células SK-N-LO presentan cambios morfológicos asociados con la apoptosis, tales como la condensación de la cromatina y la fragmentación nuclear. Además, el GANT61 reduce la expresión de proteínas como GLI2 y la survivina, que son importantes para la progresión del ciclo celular y la supervivencia, al tiempo que aumenta la expresión de p21, un inhibidor de las quinasas dependientes de ciclina.

Además, las células SK-N-LO se han utilizado para estudiar la señalización de los receptores opioides. Estas células han sido modificadas genéticamente para expresar el receptor opioide μ, lo que las convierte en un modelo valioso para investigar la interacción entre la analgesia inducida por opioides y las vías de señalización intracelulares. Por ejemplo, los estudios han demostrado que la morfina estimula la fosforilación de Akt en las células SK-N-LO a través de la vía PI3Kγ, un proceso que puede ser modulado por la señalización del AMPc. Esto resalta la versatilidad de las células SK-N-LO para explorar tanto la biología del cáncer como la neurofarmacología.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.