SK-N-LO

SK-N-LO-solulinja on ihmisen neuroblastooma-solulinja, jota käytetään tutkimuksessa neuroblastooman sekä apoptoosin mekanismien ja syövän signaalireittien tutkimiseen. Se luokitellaan myös primitiiviseksi neuroekodermikasvaimeksi (PNET), ja siinä on EWS-FLI1-fuusiogeeni, jota tavataan yleisesti Ewingin sarkooman perheen kasvaimissa (ESFT). Tämä fuusiogeeni johtuu kromosomitranslokaatiosta, ja sillä on keskeinen rooli näiden kasvainsolujen onkogeenisessä käyttäytymisessä.

SK-N-LO-solut ovat erityisen herkkiä tietyille onkogeenisiin signaalireitteihin kohdistuville inhibiittoreille. Esimerkiksi GLI:n estäjän GANT61:n on osoitettu indusoivan kaspaasista riippumatonta apoptoosia SK-N-LO-soluissa. GANT61 häiritsee GLI1- ja GLI2-välitteistä transkriptiota Hedgehog (Hh) -signalointireitillä, joka on kriittinen solujen selviytymisen ja lisääntymisen kannalta tässä solulinjassa. Kun SK-N-LO-soluja hoidetaan GANT61:llä, niissä esiintyy apoptoosiin liittyviä morfologisia muutoksia, kuten kromatiinin tiivistymistä ja ytimen pirstoutumista. Lisäksi GANT61 vähentää solusyklin etenemisen ja eloonjäämisen kannalta tärkeiden proteiinien, kuten GLI2:n ja survivinin, ilmentymistä ja lisää sykliiniriippuvaisen kinaasin estäjän p21:n ilmentymistä.

Lisäksi SK-N-LO-soluja on käytetty opioidireseptorin signaloinnin tutkimiseen. Nämä solut on muokattu ilmentämään μ-opioidireseptoria, mikä tekee niistä arvokkaan mallin opioidien aiheuttaman analgesian ja solunsisäisten signaalireittien välisen vuorovaikutuksen tutkimiseen. Tutkimukset ovat esimerkiksi osoittaneet, että morfiini stimuloi Akt-fosforylaatiota SK-N-LO-soluissa PI3Kγ-reitin kautta, ja tätä prosessia voidaan moduloida cAMP-signaloinnilla. Tämä korostaa SK-N-LO-solujen monipuolisuutta sekä syöpäbiologian että neurofarmakologian tutkimisessa.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa