
- Tissue
- מוח
- Disease
- גידול נוירואקטודרמלי פרימיטיבי
- Metastatic site
- מח עצם
- Synonyms
- SK-N-L0, SKN-LO, SKNLO
Documents
SK-N-LO
Cell line · Product number 300400
The SK-N-LO cell line is a human neuroblastoma cell line used in research to study neuroblastoma as well as mechanisms of apoptosis and cancer signaling p...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
קו התאים SK-N-LO הוא קו תאים אנושי של נוירובלסטומה המשמש במחקר לחקר נוירובלסטומה, כמו גם מנגנונים של אפופטוזיס ומסלולי איתות סרטניים. הוא מסווג גם כקו תאים של גידול נוירואקטודרמלי פרימיטיבי (PNET) ונושא את הגן הממוזג EWS-FLI1, הנפוץ בגידולים ממשפחת סרקומה של יואינג (ESFT). גן ממוזג זה נוצר כתוצאה מהעברה כרומוזומלית וממלא תפקיד מרכזי בהתנהגות האונקוגנית של תאי הגידול הללו.
תאי SK-N-LO רגישים במיוחד למעכבים מסוימים המכוונים למסלולי איתות אונקוגניים. לדוגמה, מעכב GLI GANT61 הוכח כגורם לאפופטוזיס בלתי תלוי בקספאז בתאי SK-N-LO. GANT61 משבש את השעתוק המתווך על ידי GLI1 ו-GLI2 במסלול האיתות Hedgehog (Hh), שהוא קריטי להישרדות התאים ולהתרבותם בקו תאים זה. כאשר מטפלים בהם ב-GANT61, תאי SK-N-LO מפגינים שינויים מורפולוגיים הקשורים לאפופטוזיס, כגון עיבוי כרומטין ופיצול גרעיני. בנוסף, GANT61 מפחית את הביטוי של חלבונים כמו GLI2 ו-survivin, החשובים להתקדמות מחזור התא ולהישרדותו, תוך הגברת הביטוי של p21, מעכב קינאז תלוי-ציקלין.
בנוסף, תאי SK-N-LO שימשו לחקר איתות קולטני אופיואידים. תאים אלה הונדסו כדי לבטא את קולטן האופיואידים μ, מה שהופך אותם למודל חשוב לחקר האינטראקציה בין שיכוך כאבים המושרה על ידי אופיואידים ומסלולי איתות תאיים. לדוגמה, מחקרים הראו כי מורפין מגרה זרחון Akt בתאי SK-N-LO באמצעות מסלול PI3Kγ, תהליך שניתן לווסת באמצעות איתות cAMP. הדבר מדגיש את הרבגוניות של תאי SK-N-LO בחקר ביולוגיה של הסרטן ונוירופרמקולוגיה.
- Tissue
- מוח
- Disease
- גידול נוירואקטודרמלי פרימיטיבי
- Metastatic site
- מח עצם
- Synonyms
- SK-N-L0
- SKN-LO
- SKNLO
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
- Karyotype
- תדירות הפנוטיפ: 0.00005
04Identifiers
- Citation
- SK-N-LO (מספר קטלוגי Cytion 300400)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_4569
05Handling and culture
- Culture medium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- 3 עד 4 x 104 תאים/סמ"ר
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים ב-50% מדיום בסיסי + 40% FBS + 10% DMSO, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקירור.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
07Donor
- Donor age
- 10 שנים
- Ethnicity
- קווקזי
08Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes






.jpg)
