Μετάβαση στο περιεχόμενο
SK-N-LO
Ιστός
Εγκέφαλος
Ασθένεια
Αρχέγονος νευροεκδερμικός όγκος
Θέση μετάστασης
Μυελός των οστών
Συνώνυμα
SK-N-L0, SKN-LO, SKNLO

Έγγραφα

SK-N-LO

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300400

The SK-N-LO cell line is a human neuroblastoma cell line used in research to study neuroblastoma as well as mechanisms of apoptosis and cancer signaling p...

€800.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά SK-N-LO είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά νευροβλαστώματος που χρησιμοποιείται στην έρευνα για τη μελέτη του νευροβλαστώματος καθώς και των μηχανισμών απόπτωσης και των μονοπατιών σηματοδότησης του καρκίνου. Ταξινομείται επίσης ως κυτταρική σειρά αρχέγονου νευροεκδερμικού όγκου (PNET) και φέρει το γονίδιο σύντηξης EWS-FLI1, το οποίο συναντάται συνήθως στους όγκους της οικογένειας σαρκώματος Ewing (ESFT). Αυτό το γονίδιο σύντηξης προκύπτει από χρωμοσωμική μετάθεση και διαδραματίζει βασικό ρόλο στην ογκογόνο συμπεριφορά αυτών των καρκινικών κυττάρων.

Τα κύτταρα SK-N-LO είναι ιδιαίτερα ευαίσθητα σε ορισμένους αναστολείς που στοχεύουν σε ογκογενετικά μονοπάτια σηματοδότησης. Για παράδειγμα, ο αναστολέας GLI GANT61 έχει αποδειχθεί ότι επάγει την ανεξάρτητη από την κασπάση απόπτωση σε κύτταρα SK-N-LO. Ο GANT61 διαταράσσει τη μεταγραφή που διαμεσολαβείται από το GLI1 και το GLI2 στο σηματοδοτικό μονοπάτι Hedgehog (Hh), το οποίο είναι κρίσιμο για την επιβίωση και τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων σε αυτή την κυτταρική σειρά. Όταν υποβάλλονται σε θεραπεία με το GANT61, τα κύτταρα SK-N-LO εμφανίζουν μορφολογικές αλλαγές που σχετίζονται με την απόπτωση, όπως συμπύκνωση της χρωματίνης και κατακερματισμό του πυρήνα. Επιπλέον, το GANT61 μειώνει την έκφραση πρωτεϊνών όπως η GLI2 και η survivin, οι οποίες είναι σημαντικές για την εξέλιξη του κυτταρικού κύκλου και την επιβίωση, ενώ αυξάνει την έκφραση της p21, ενός αναστολέα της κυκλινοεξαρτώμενης κινάσης.

Επιπλέον, τα κύτταρα SK-N-LO έχουν χρησιμοποιηθεί για τη μελέτη της σηματοδότησης των υποδοχέων οπιοειδών. Αυτά τα κύτταρα έχουν τροποποιηθεί ώστε να εκφράζουν τον υποδοχέα μ-οπιοειδών, γεγονός που τα καθιστά πολύτιμο μοντέλο για τη διερεύνηση της αλληλεπίδρασης μεταξύ της επαγόμενης από οπιοειδή αναλγησίας και των ενδοκυτταρικών μονοπατιών σηματοδότησης. Για παράδειγμα, μελέτες έχουν δείξει ότι η μορφίνη διεγείρει τη φωσφορυλίωση της Akt στα κύτταρα SK-N-LO μέσω του μονοπατιού PI3Kγ, μια διαδικασία που μπορεί να διαμορφωθεί από τη σηματοδότηση cAMP. Αυτό αναδεικνύει την ευελιξία των κυττάρων SK-N-LO στη διερεύνηση τόσο της βιολογίας του καρκίνου όσο και της νευροφαρμακολογίας.

Ιστός
Εγκέφαλος
Ασθένεια
Αρχέγονος νευροεκδερμικός όγκος
Θέση μετάστασης
Μυελός των οστών
Συνώνυμα
  • SK-N-L0
  • SKN-LO
  • SKNLO

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής
Καρυότυπος
Προϊόν συχνότητας φαινοτύπων: 0.00005

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
SK-N-LO (αριθμός καταλόγου Cytion 300400)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_4569

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-γλουταμίνη, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (αριθμός άρθρου Cytion 820100a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS και 1% NEAA
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
3 έως 4 x 104 κύτταρα/cm2
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε 50% βασικό μέσο + 40% FBS + 10% DMSO ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

07Δωρητής

Ηλικία δωρητή
10 χρόνια
Εθνικότητα
Καυκάσιος