SK-N-LO

La linea cellulare SK-N-LO è una linea cellulare di neuroblastoma umano utilizzata nella ricerca per studiare il neuroblastoma e i meccanismi di apoptosi e le vie di segnalazione del cancro. È anche classificata come linea cellulare di tumore neuroectodermico primitivo (PNET) e porta il gene di fusione EWS-FLI1, comunemente presente nei tumori della famiglia del sarcoma di Ewing (ESFT). Questo gene di fusione deriva da una traslocazione cromosomica e svolge un ruolo chiave nel comportamento oncogenico di queste cellule tumorali.

Le cellule SK-N-LO sono particolarmente sensibili ad alcuni inibitori che colpiscono le vie di segnalazione oncogeniche. Ad esempio, l'inibitore GLI GANT61 ha dimostrato di indurre l'apoptosi indipendente dalla caspasi nelle cellule SK-N-LO. GANT61 interrompe la trascrizione mediata da GLI1 e GLI2 nella via di segnalazione Hedgehog (Hh), che è fondamentale per la sopravvivenza e la proliferazione cellulare in questa linea cellulare. Quando vengono trattate con GANT61, le cellule SK-N-LO mostrano cambiamenti morfologici associati all'apoptosi, come la condensazione della cromatina e la frammentazione nucleare. Inoltre, GANT61 riduce l'espressione di proteine come GLI2 e survivin, importanti per la progressione del ciclo cellulare e la sopravvivenza, mentre aumenta l'espressione di p21, un inibitore della chinasi ciclina-dipendente.

Inoltre, le cellule SK-N-LO sono state utilizzate per studiare la segnalazione dei recettori oppioidi. Queste cellule sono state modificate per esprimere il recettore μ-opioide, il che le rende un modello prezioso per studiare l'interazione tra l'analgesia indotta dagli oppioidi e le vie di segnalazione intracellulare. Ad esempio, alcuni studi hanno dimostrato che la morfina stimola la fosforilazione di Akt nelle cellule SK-N-LO attraverso la via PI3Kγ, un processo che può essere modulato dalla segnalazione di cAMP. Ciò evidenzia la versatilità delle cellule SK-N-LO nell'esplorare sia la biologia del cancro che la neurofarmacologia.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia