Preskoči na vsebino
SK-N-LO
Tkivo
Možgani
Bolezen
Primitivni nevroektodermalni tumor
Mesto metastaze
Kostni mozeg
Sinonimi
SK-N-L0, SKN-LO, SKNLO

Dokumenti

SK-N-LO

Cell line · Številka izdelka 300400

The SK-N-LO cell line is a human neuroblastoma cell line used in research to study neuroblastoma as well as mechanisms of apoptosis and cancer signaling p...

€800.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija SK-N-LO je celična linija človeškega nevroblastoma, ki se uporablja v raziskavah za preučevanje nevroblastoma ter mehanizmov apoptoze in signalnih poti raka. Razvrščena je tudi med celične linije primitivnega nevroektodermalnega tumorja (PNET) in nosi fuzijski gen EWS-FLI1, ki ga pogosto najdemo v tumorjih družine Ewingovega sarkoma (ESFT). Ta fuzijski gen je posledica kromosomske translokacije in ima ključno vlogo pri onkogenem obnašanju teh tumorskih celic.

Celice SK-N-LO so še posebej občutljive na nekatere zaviralce, ki delujejo na onkogene signalne poti. Na primer, pokazalo se je, da zaviralec GLI GANT61 v celicah SK-N-LO povzroči apoptozo, neodvisno od kaspaz. GANT61 prekine transkripcijo, ki jo posredujeta GLI1 in GLI2 v signalni poti Hedgehog (Hh), ki je ključna za preživetje in razmnoževanje celic v tej celični liniji. Pri zdravljenju z GANT61 celice SK-N-LO kažejo morfološke spremembe, povezane z apoptozo, kot sta kondenzacija kromatina in fragmentacija jedra. Poleg tega GANT61 zmanjša izražanje beljakovin, kot sta GLI2 in survivin, ki sta pomembna za napredovanje celičnega cikla in preživetje, hkrati pa poveča izražanje p21, inhibitorja ciklinsko odvisne kinaze.

Poleg tega so bile celice SK-N-LO uporabljene za preučevanje signalizacije opioidnih receptorjev. Te celice so bile oblikovane tako, da izražajo μ-opioidni receptor, zaradi česar so dragocen model za preučevanje interakcije med opioidno povzročeno analgezijo in znotrajceličnimi signalnimi potmi. Študije so na primer pokazale, da morfin v celicah SK-N-LO spodbuja fosforilacijo akta prek poti PI3Kγ, proces, ki ga je mogoče modulirati s signalizacijo cAMP. To poudarja vsestranskost celic SK-N-LO pri raziskovanju biologije raka in nevrofarmakologije.

Tkivo
Možgani
Bolezen
Primitivni nevroektodermalni tumor
Mesto metastaze
Kostni mozeg
Sinonimi
  • SK-N-L0
  • SKN-LO
  • SKNLO

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Kariotip
Fenotip Pogostost izdelka: 0.00005

04Identifikatorji

Navajanje vira
SK-N-LO (Cytionova kataloška številka 300400)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4569

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS in 1 % NEAA
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
3 do 4 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo 50 % osnovno gojišče + 40 % FBS + 10 % DMSO ali CM-1 (kataloška številka Cytion 800100), ki vsebuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, ki ga povzroča krio.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
10 let
Etnična pripadnost
Kavkaški