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SK-N-LO

Cell line · 제품 번호 300400

The SK-N-LO cell line is a human neuroblastoma cell line used in research to study neuroblastoma as well as mechanisms of apoptosis and cancer signaling p...

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롯
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01일반 정보

설명

SK-N-LO 세포주는 신경모세포종과 세포 사멸 메커니즘 및 암 신호 전달 경로를 연구하는 데 사용되는 인간 신경모세포종 세포주입니다. 또한 원시 신경외배엽 종양(PNET) 세포주로 분류되며 유잉육종 가족 종양(ESFT)에서 흔히 발견되는 EWS-FLI1 융합 유전자를 가지고 있습니다. 이 융합 유전자는 염색체 전좌로 인해 발생하며 이러한 종양 세포의 발암 작용에 핵심적인 역할을 합니다.

SK-N-LO 세포는 특히 발암성 신호 경로를 표적으로 하는 특정 억제제에 민감합니다. 예를 들어, GLI 억제제인 GANT61은 SK-N-LO 세포에서 카스파제 독립적 세포 사멸을 유도하는 것으로 나타났습니다. GANT61은 이 세포주에서 세포 생존과 증식에 중요한 고슴도치(Hh) 신호 전달 경로에서 GLI1 및 GLI2 매개 전사를 방해합니다. GANT61로 처리하면 SK-N-LO 세포는 염색질 응축 및 핵 단편화와 같은 세포 사멸과 관련된 형태학적 변화를 보입니다. 또한 GANT61은 세포 주기 진행과 생존에 중요한 GLI2 및 서바이빈과 같은 단백질의 발현을 감소시키는 반면 사이클린 의존성 키나제 억제제인 p21의 발현은 증가시킵니다.

또한 오피오이드 수용체 신호를 연구하기 위해 SK-N-LO 세포를 활용했습니다. 이 세포는 μ-오피오이드 수용체를 발현하도록 조작되어 오피오이드에 의한 진통과 세포 내 신호 경로 간의 상호 작용을 연구하는 데 유용한 모델입니다. 예를 들어, 연구에 따르면 모르핀은 cAMP 신호에 의해 조절될 수 있는 과정인 PI3Kγ 경로를 통해 SK-N-LO 세포에서 Akt 인산화를 자극하는 것으로 나타났습니다. 이는 암 생물학과 신경 약리학을 모두 탐구하는 데 있어 SK-N-LO 세포의 다재다능함을 강조합니다.

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02분류

생물체
인간
성
남성
성장 특성
준수자
생물안전 등급
1

03특징

형태학
상피 유사
염색체형
표현형 빈도 제품: 0.00005

04식별자

인용
SK-N-LO(사이티온 카탈로그 번호 300400)
NCBI 세금 식별번호
9606
셀로사우루스
CVCL_4569

05취급 및 배양

배지
EMEM(MEM 이글), w: 2mM L-글루타민, w: 2.2g/L NaHCO3, w: EBSS(사이티온 제품 번호 820100a)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
배지에 10% FBS와 1% NEAA를 보충합니다
분리 시약
아큐타제
재배양
부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
파종 밀도
3~4 × 10⁴ 세포/cm²
유체 교체
주 2~3회
해동 및 배양
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로 50% 기저 배지 + 40% FBS + 10% DMSO 또는 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제를 포함하는 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

07기부자

기증자 연령
10년
민족
백인