Ga naar de inhoud
SK-N-LO
Weefsel
Hersenen
Ziekte
Primitieve neuroectodermale tumor
Plaats van uitzaaiingen
Beenmerg
Synoniemen
SK-N-L0, SKN-LO, SKNLO

Documenten

SK-N-LO

Cell line · Productnummer 300400

The SK-N-LO cell line is a human neuroblastoma cell line used in research to study neuroblastoma as well as mechanisms of apoptosis and cancer signaling p...

€800.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De SK-N-LO cellijn is een humane neuroblastoom cellijn die gebruikt wordt in onderzoek naar neuroblastoom en de mechanismen van apoptose en kankersignalering. Het is ook geclassificeerd als een primitieve neuroectodermale tumor (PNET) cellijn en draagt het EWS-FLI1 fusiegen, dat vaak wordt gevonden in Ewing's sarcoom familie tumoren (ESFT). Dit fusiegen is het resultaat van een chromosomale translocatie en speelt een sleutelrol in het oncogene gedrag van deze tumorcellen.

SK-N-LO cellen zijn bijzonder gevoelig voor bepaalde remmers die zich richten op oncogene signaalwegen. Er is bijvoorbeeld aangetoond dat de GLI-remmer GANT61 caspase-onafhankelijke apoptose induceert in SK-N-LO cellen. GANT61 verstoort GLI1- en GLI2-gemedieerde transcriptie in de Hedgehog (Hh)-signaleringsroute, die cruciaal is voor celoverleving en proliferatie in deze cellijn. Bij behandeling met GANT61 vertonen SK-N-LO cellen morfologische veranderingen die geassocieerd worden met apoptose, zoals chromatinecondensatie en nucleaire fragmentatie. Bovendien vermindert GANT61 de expressie van eiwitten zoals GLI2 en survivin, die belangrijk zijn voor celcyclusprogressie en overleving, terwijl de expressie van p21, een cycline-afhankelijke kinaseremmer, toeneemt.

Daarnaast zijn SK-N-LO cellen gebruikt om de opioïde receptor signalering te bestuderen. Deze cellen zijn ontworpen om de μ-opioïde receptor tot expressie te brengen, waardoor ze een waardevol model zijn voor het onderzoeken van de interactie tussen opioïde-geïnduceerde analgesie en intracellulaire signaalwegen. Studies hebben bijvoorbeeld aangetoond dat morfine Akt-fosforylering stimuleert in SK-N-LO cellen via de PI3Kγ-route, een proces dat gemoduleerd kan worden door cAMP-signalering. Dit benadrukt de veelzijdigheid van SK-N-LO cellen bij het onderzoeken van zowel kankerbiologie als neurofarmacologie.

Weefsel
Hersenen
Ziekte
Primitieve neuroectodermale tumor
Plaats van uitzaaiingen
Beenmerg
Synoniemen
  • SK-N-L0
  • SKN-LO
  • SKNLO

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Karyotype
Fenotype Frequentie Product: 0.00005

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
SK-N-LO (Cytion catalogusnummer 300400)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_4569

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS en 1% NEAA
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
3 tot 4 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we 50% basaal medium + 40% FBS + 10% DMSO, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en cryogeïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Leeftijd van de donor
10 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch