Pereiti prie turinio
GM12878
Audinys
Periferinis kraujas
Sinonimai
GM-12878

Dokumentai

GM12878

Cell line · Prekės numeris 305439

GM12878 ląstelių linija yra gerai ištirta žmogaus limfoblastoidinė ląstelių linija, transformuota Epštejno-Barro virusu (EBV). Ji buvo naudojama kaip standartinė Ti...

€550.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

GM12878 ląstelių linija yra gerai apibūdinta žmogaus limfoblastoidinių ląstelių linija, transformuota Epšteino-Barro virusu (EBV). Ji buvo naudojama kaip standartinė 1 lygio ląstelių linija DNR elementų enciklopedijos (ENCODE) projekte, todėl yra vienas plačiausiai tiriamų genetinių ir transkriptominių tyrimų modelių. GM12878 yra kilusi iš moteriškos lyties donorės ir pasižymi stabiliu kariotipu, palyginti su dažniau naudojamomis ląstelių linijomis, tokiomis kaip HeLa ir HEK293, kurios pasižymi didele chromosomų aneuploidija.

Šios ląstelės yra ypač vertingos chromatino struktūrai, genų reguliavimui ir imuniniam atsakui pažinti, nes yra B limfocitų linijos. GM12878 ląstelės buvo naudojamos didelės apimties tyrimuose, įskaitant ChIP-seq analizes, skirtas transkripcijos veiksnių prisijungimo vietoms ir histonų modifikacijoms kartografuoti, MNase-seq - nukleosomų kartografavimui, ir RNR-seq - transkriptomo profiliavimui. Tyrimai su GM12878 išaiškino transkripcijos veiksnių sąveikos aspektus, pavyzdžiui, FOXM1 ir jo kofaktorių jungimąsi bei jų vaidmenį ląstelės ciklo ir imuninio atsako keliuose.

Be to, GM12878 tapo genomo redagavimo eksperimentų, kuriais siekiama sukurti etaloninę medžiagą naujos kartos sekoskaitos (NGS) patvirtinimui, platforma. Pavyzdžiui, GM12878 buvo atlikti CRISPR/Cas9 tarpininkaujami genomo pakeitimai, siekiant sukurti kontrolinę medžiagą vėžio mutacijų analizei, o tai rodo, kad ji taikoma tiksliojoje medicinoje ir genetiniuose tyrimuose.

Audinys
Periferinis kraujas
Sinonimai
  • GM-12878

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Pakaba
Biologinio saugumo lygis
2

03Charakteristikos

Morfologija
Į limfoblastus panašus

04Identifikatoriai

Nuoroda
GM12878 (Cytion katalogo numeris 305439)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_7526

05Išraiška ir jautrumas

Mutacijų profilis
Mutacija: CYP2C19, p.Pro227Pro (c.681G>A)
Virusai
Transformantas: Epšteino-Barro virusas (EBV)

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 15 % FBS
Subkultūrinis auginimas
Kultūras prižiūrėkite periodiškai papildydami arba keisdami terpę. Kultūras pradėkite su 5 x 105 ląstelių/ml tankiu ir, siekdami optimalaus augimo, palaikykite ląstelių koncentraciją nuo 3 x 105 iki 1 x 106 ląstelių/ml.
Atkūrimas po atšilimo
Po atšildymo leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso bent 24 valandas
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
Nenustatyta