GM12878

Celična linija GM12878 je dobro opisana človeška limfoblastoidna celična linija, spremenjena z virusom Epstein-Barr (EBV). Uporablja se kot standardna celična linija stopnje 1 v projektu ENCODE (Encyclopedia of DNA Elements), zato je eden najbolj preučevanih modelov za genetske in transkriptomske raziskave. GM12878, ki izvira od ženskega darovalca, je znana po svojem stabilnem kariotipu v primerjavi s pogosteje uporabljenimi celičnimi linijami, kot sta HeLa in HEK293, ki imata obsežno kromosomsko aneuploidijo.

Te celice so zaradi svoje B-limfocitne linije še posebej dragocene za razumevanje strukture kromatina, regulacije genov in imunskega odziva. Celice GM12878 so bile uporabljene v visoko zmogljivih študijah, vključno z analizami ChIP-seq za kartiranje vezavnih mest transkripcijskih faktorjev in modifikacij histonov, MNase-seq za kartiranje nukleosomov in RNA-seq za profiliranje transkriptoma. Študije z GM12878 so razjasnile vidike interakcij transkripcijskih faktorjev, kot so vezava FOXM1 in njegovih kofaktorjev, ter njihove vloge v celičnem ciklu in poteh imunskega odziva.

Poleg tega je GM12878 služil kot platforma za poskuse urejanja genoma, namenjene ustvarjanju referenčnih materialov za potrjevanje sekvenciranja naslednje generacije (NGS). V GM12878 so bile na primer uvedene spremembe genoma, posredovane s CRISPR/Cas9, za razvoj kontrolnih materialov za analizo mutacij raka, kar ponazarja njegovo uporabo v precizni medicini in genetskem testiranju.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo