GM12878

Dòng tế bào GM12878 là một dòng tế bào lymphoblastoid người được đặc trưng rõ ràng, được biến đổi bởi virus Epstein-Barr (EBV). Nó đã được sử dụng làm dòng tế bào tiêu chuẩn cấp 1 trong dự án Bách khoa toàn thư về các yếu tố DNA (ENCODE), khiến nó trở thành một trong những mô hình được nghiên cứu rộng rãi nhất cho nghiên cứu di truyền và chuyển mã. Xuất phát từ một người hiến tặng nữ, GM12878 nổi tiếng với bộ nhiễm sắc thể ổn định so với các dòng tế bào được sử dụng phổ biến hơn như HeLa và HEK293, vốn có sự bất thường nhiễm sắc thể nghiêm trọng.

Các tế bào này đặc biệt có giá trị trong việc hiểu cấu trúc chromatin, điều hòa gen và phản ứng miễn dịch do nguồn gốc từ dòng tế bào lympho B. Tế bào GM12878 đã được sử dụng trong các nghiên cứu quy mô lớn, bao gồm phân tích ChIP-seq để xác định vị trí gắn kết của các yếu tố chuyển dịch và sửa đổi histone, MNase-seq để lập bản đồ nucleosome, và RNA-seq để phân tích biểu hiện gen. Các nghiên cứu liên quan đến GM12878 đã làm sáng tỏ các khía cạnh của tương tác giữa các yếu tố chuyển dịch, chẳng hạn như sự gắn kết của FOXM1 và các yếu tố đồng tác động của nó, cũng như vai trò của chúng trong các con đường chu kỳ tế bào và phản ứng miễn dịch.

Hơn nữa, GM12878 đã được sử dụng làm nền tảng cho các thí nghiệm chỉnh sửa gen nhằm tạo ra vật liệu tham chiếu cho việc xác thực trình tự gen thế hệ tiếp theo (NGS). Ví dụ, các sửa đổi gen bằng CRISPR/Cas9 đã được đưa vào GM12878 để phát triển vật liệu đối chứng cho phân tích đột biến ung thư, minh họa ứng dụng của nó trong y học chính xác và xét nghiệm di truyền.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.