GM12878

Die Zelllinie GM12878 ist eine gut charakterisierte menschliche lymphoblastoide Zelllinie, die mit dem Epstein-Barr-Virus (EBV) transformiert wurde. Sie wurde als Standard-Zelllinie der Stufe 1 im Rahmen des ENCODE-Projekts (Encyclopedia of DNA Elements) verwendet und ist damit eines der am häufigsten untersuchten Modelle für die genetische und transkriptomische Forschung. GM12878 stammt von einer weiblichen Spenderin und ist bekannt für ihren stabilen Karyotyp im Vergleich zu häufiger verwendeten Zelllinien wie HeLa und HEK293, die eine starke chromosomale Aneuploidie aufweisen.

Diese Zellen sind aufgrund ihrer B-Lymphozyten-Linie besonders wertvoll für das Verständnis der Chromatinstruktur, der Genregulation und der Immunantwort. GM12878-Zellen wurden in Hochdurchsatzstudien eingesetzt, darunter ChIP-seq-Analysen zur Kartierung von Transkriptionsfaktor-Bindungsstellen und Histonmodifikationen, MNase-seq für die Nukleosomkartierung und RNA-seq für die Transkriptom-Profilierung. Studien mit GM12878 haben Aspekte der Interaktionen von Transkriptionsfaktoren aufgeklärt, wie z. B. die Bindung von FOXM1 und seinen Kofaktoren sowie deren Rolle im Zellzyklus und bei der Immunantwort.

Darüber hinaus diente GM12878 als Plattform für Genom-Editierungsexperimente mit dem Ziel, Referenzmaterialien für die Validierung der Sequenzierung der nächsten Generation (NGS) zu schaffen. So wurden beispielsweise CRISPR/Cas9-vermittelte Genomveränderungen in GM12878 eingeführt, um Kontrollmaterialien für die Analyse von Krebsmutationen zu entwickeln, was seine Anwendung in der Präzisionsmedizin und bei Gentests verdeutlicht.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung