Skip to content
GM12878
Tissue
דם היקפי
Synonyms
GM-12878

Documents

GM12878

Cell line · Product number 305439

The GM12878 cell line is a well-characterized human lymphoblastoid cell line, transformed with Epstein-Barr virus (EBV). It has been used as a standard Ti...

US$800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים GM12878 הוא קו תאים לימפוציטואידי אנושי המאופיין היטב, שעבר טרנספורמציה באמצעות נגיף אפשטיין-בר (EBV). הוא שימש כקו תאים סטנדרטי מדרגה 1 בפרויקט Encyclopedia of DNA Elements (ENCODE), מה שהופך אותו לאחד המודלים הנחקרים ביותר במחקר גנטי וטרנסקריפטומי. GM12878, שמקורו בתורמת, ידוע בקריוטיפ היציב שלו בהשוואה לקווי תאים נפוצים יותר כגון HeLa ו-HEK293, הסובלים מאנאופלואידיות כרומוזומלית נרחבת.

תאים אלה חשובים במיוחד להבנת מבנה הכרומטין, ויסות גנים ותגובה חיסונית בשל השושלת הלימפוציטית B שלהם. תאי GM12878 שימשו במחקרים בעלי תפוקה גבוהה, כולל ניתוחי ChIP-seq למיפוי אתרי קישור של גורמי שעתוק ושינויים בהיסטונים, MNase-seq למיפוי נוקלאוזומים ו-RNA-seq לפרופיל הטרנסקריפטום. מחקרים שבוצעו עם GM12878 הבהירו היבטים של אינטראקציות בין גורמי שעתוק, כגון קישור FOXM1 וגורמי העזר שלו, ותפקידם במחזור התא ובמסלולי התגובה החיסונית.

יתר על כן, GM12878 שימש כפלטפורמה לניסויים בעריכת גנום שמטרתם ליצור חומרים התייחסות לאימות ריצוף הדור הבא (NGS). לדוגמה, שינויים בגנום בתיווך CRISPR/Cas9 הוכנסו ל-GM12878 כדי לפתח חומרים בקרה לניתוח מוטציות סרטניות, מה שממחיש את יישומם ברפואה מדויקת ובבדיקות גנטיות.

Tissue
דם היקפי
Synonyms
  • GM-12878

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Suspension
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
דמוי לימפוציט

04Identifiers

Citation
GM12878 (מספר קטלוגי Cytion 305439)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_7526

05Expression and susceptibility

Mutational profile
מוטציה: CYP2C19, p.Pro227Pro (c.681G>A)
Viruses
טרנספורמנט: נגיף אפשטיין-בר (EBV)

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 15% FBS
Subculturing
שמרו על התרבויות על ידי הוספה או החלפה תקופתית של המצע. התחילו את התרבויות בצפיפות של 5 x 105 תאים/מ"ל ושמרו על ריכוז התאים בטווח של 3 x 105 עד 1 x 106 תאים/מ"ל לצורך צמיחה מיטבית.
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, יש לאפשר לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה למשך 24 שעות לפחות
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
לא צוין