GM12878

GM12878 rakuliin on hästi iseloomustatud inimese lümfoblastoidne rakuliin, mis on transformeeritud Epstein-Barri viirusega (EBV). Seda on kasutatud standardse 1. taseme rakuliinina DNA-elementide entsüklopeedia (ENCODE) projektis, mis teeb sellest ühe kõige laialdasemalt uuritud mudeli geneetilisteks ja transkriptoomilisteks uuringuteks. GM12878 pärineb naissoost doonorilt ja on tuntud oma stabiilse karüotüübi poolest võrreldes sagedamini kasutatavate rakuliinidega, nagu HeLa ja HEK293, millel on ulatuslik kromosoomide aneuploidsus.

Need rakud on eriti väärtuslikud kromatiini struktuuri, geeniregulatsiooni ja immuunvastuse mõistmiseks nende B-lümfotsüütide liini tõttu. GM12878 rakke on kasutatud kõrge läbilaskevõimega uuringutes, sealhulgas ChIP-seq analüüsid transkriptsioonifaktorite seondumiskohtade ja histoonmodifikatsioonide kaardistamiseks, MNase-seq nukleosoomide kaardistamiseks ja RNA-seq transkriptoomi profiilide koostamiseks. GM12878 uuringutes on selgitatud transkriptsioonifaktorite koostoimete aspekte, näiteks FOXM1 ja selle kaasfaktoritega seondumist ning nende rolli rakutsüklis ja immuunreaktsiooniradadel.

Lisaks on GM12878 olnud platvormiks genoomi redigeerimise katsetele, mille eesmärk on luua võrdlusmaterjalid järgmise põlvkonna sekveneerimise (NGS) valideerimiseks. Näiteks CRISPR/Cas9-vahendatud genoomimuudatused on viidud GM12878-sse, et töötada välja kontrollmaterjalid vähimutatatsioonide analüüsiks, mis illustreerib selle kasutamist täppismeditsiinis ja geneetilistes testides.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest