GM12878

A linhagem celular GM12878 é uma linhagem de células linfoblastoides humanas bem caracterizada, transformada pelo vírus de Epstein-Barr (EBV). Ela tem sido utilizada como linha celular padrão de Nível 1 no projeto Enciclopédia dos Elementos de DNA (ENCODE), tornando-se um dos modelos mais amplamente estudados para pesquisas genéticas e transcriptômicas. Originária de uma doadora, a GM12878 é conhecida por seu cariótipo estável em comparação com linhas celulares mais comumente utilizadas, como HeLa e HEK293, que apresentam aneuploidia cromossômica extensa.

Essas células são particularmente valiosas para a compreensão da estrutura da cromatina, da regulação gênica e da resposta imunológica devido à sua linhagem de linfócitos B. As células GM12878 têm sido empregadas em estudos de alto rendimento, incluindo análises de ChIP-seq para mapear locais de ligação de fatores de transcrição e modificações de histonas, MNase-seq para mapeamento de nucleossomos e RNA-seq para perfilagem do transcriptoma. Estudos envolvendo as células GM12878 esclareceram aspectos das interações dos fatores de transcrição, como a ligação do FOXM1 e de seus cofatores, e seus papéis nas vias do ciclo celular e da resposta imunológica.

Além disso, o GM12878 tem servido como plataforma para experimentos de edição genômica com o objetivo de criar materiais de referência para validação de sequenciamento de última geração (NGS). Por exemplo, modificações genômicas mediadas por CRISPR/Cas9 foram introduzidas no GM12878 para desenvolver materiais de controle para a análise de mutações oncológicas, ilustrando sua aplicação na medicina de precisão e nos testes genéticos.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.