الانتقال إلى المحتوى
GM12878
الأنسجة
الدم المحيطي
المرادفات
GM-12878

المستندات

GM12878

Cell line · رقم المنتج 305439

سلسلة الخلايا GM12878 هي سلسلة خلايا ليمفوبلاستويدية بشرية موصوفة جيدًا، تم تحويلها بفيروس إبشتاين-بار (EBV). وقد استُخدمت كنموذج قياسي...

€550.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

الخط الخلوي GM12878 هو خط خلوي ليمفاوبلاستويد بشري مميز جيداً، تم تحويله بفيروس إبشتاين-بار (EBV). وقد تم استخدامه كخط خلوي قياسي من المستوى الأول في مشروع موسوعة عناصر الحمض النووي (ENCODE)، مما يجعله أحد أكثر النماذج التي تمت دراستها على نطاق واسع في الأبحاث الجينية والنسخية. يُعرف GM12878، الذي نشأ من متبرعة أنثى، بنمطه النووي المستقر مقارنةً بخطوط الخلايا الأكثر استخداماً مثل HeLa وHEK293 التي تتسم باختلال الصيغة الصبغية الصبغية على نطاق واسع.

تُعد هذه الخلايا ذات قيمة خاصة لفهم بنية الكروماتين وتنظيم الجينات والاستجابة المناعية بسبب سلالة الخلايا الليمفاوية البائية. وقد تم استخدام خلايا GM12878 في دراسات عالية الإنتاجية، بما في ذلك تحليلات ChIP-seq لرسم خريطة لمواقع ارتباط عامل النسخ وتعديلات الهيستون، وMNase-seq لرسم خريطة النوكليوسوم، وRNA-seq لتحديد ملامح النسخ. وقد أوضحت الدراسات التي شملت GM12878 جوانب تفاعلات عامل النسخ، مثل ارتباط عامل النسخ FOXM1 والعوامل المساعدة له، وأدوارها في دورة الخلية ومسارات الاستجابة المناعية.

وعلاوة على ذلك، كان GM12878 بمثابة منصة لتجارب تحرير الجينوم التي تهدف إلى إنشاء مواد مرجعية للتحقق من صحة تسلسل الجيل التالي (NGS). على سبيل المثال، أُدخلت تعديلات الجينوم بوساطة CRISPR/Cas9 في الجينوم GM12878 لتطوير مواد تحكم لتحليل الطفرات السرطانية، مما يوضح تطبيقها في الطب الدقيق والاختبارات الجينية.

الأنسجة
الدم المحيطي
المرادفات
  • GM-12878

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
التعليق
مستوى السلامة البيولوجية
2

03الخصائص

المورفولوجيا
الخلايا اللمفاوية الشبيهة بالأرومة اللمفاوية

04المعرّفات

المرجع
GM12878 (الرقم الكتالوجي لسيتيون 305439)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_7526

05التعبير والقابلية للإصابة

الأنماط الطفريّة
الطفرة: CYP2C19, p.Pro227Pro (c.681G>A)
الفيروسات
المتحول: فيروس إبشتاين بار (EBV)

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 15٪ من ال FBS
إعادة الاستنبات
حافظ على الثقافات عن طريق إضافة أو استبدال الوسط بشكل دوري. ابدأ الثقافات بكثافة 5 × 105 خلية/مل وحافظ على تركيز الخلايا في نطاق 3 × 105 إلى 1 × 106 خلية/مل لتحقيق النمو الأمثل.
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الإذابة، اترك الخلايا لتتعافى من عملية التجميد لمدة 24 ساعة على الأقل
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
غير محدد