GM12878

Linia komórkowa GM12878 jest dobrze scharakteryzowaną ludzką linią komórek limfoblastoidalnych, transformowaną wirusem Epsteina-Barr (EBV). Została ona wykorzystana jako standardowa linia komórkowa poziomu 1 w projekcie Encyclopedia of DNA Elements (ENCODE), co czyni ją jednym z najczęściej badanych modeli do badań genetycznych i transkryptomicznych. Pochodząca od żeńskiego dawcy, GM12878 jest znana ze swojego stabilnego kariotypu w porównaniu z częściej stosowanymi liniami komórkowymi, takimi jak HeLa i HEK293, które mają rozległą aneuploidię chromosomalną.

Komórki te są szczególnie cenne dla zrozumienia struktury chromatyny, regulacji genów i odpowiedzi immunologicznej ze względu na ich linię limfocytów B. Komórki GM12878 zostały wykorzystane w badaniach o wysokiej przepustowości, w tym w analizach ChIP-seq do mapowania miejsc wiązania czynników transkrypcyjnych i modyfikacji histonów, MNase-seq do mapowania nukleosomów oraz RNA-seq do profilowania transkryptomu. Badania z udziałem GM12878 pozwoliły wyjaśnić aspekty interakcji czynników transkrypcyjnych, takie jak wiązanie FOXM1 i jego kofaktorów oraz ich rolę w cyklu komórkowym i szlakach odpowiedzi immunologicznej.

Ponadto GM12878 posłużył jako platforma do eksperymentów edycji genomu mających na celu stworzenie materiałów referencyjnych do walidacji sekwencjonowania nowej generacji (NGS). Na przykład, modyfikacje genomu za pośrednictwem CRISPR/Cas9 zostały wprowadzone do GM12878 w celu opracowania materiałów kontrolnych do analizy mutacji nowotworowych, ilustrując jego zastosowanie w medycynie precyzyjnej i testach genetycznych.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym