Μετάβαση στο περιεχόμενο
GM12878
Ιστός
Περιφερικό αίμα
Συνώνυμα
GM-12878

Έγγραφα

GM12878

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305439

Η κυτταρική σειρά GM12878 είναι μια καλά χαρακτηρισμένη ανθρώπινη λεμφοβλαστοειδής κυτταρική σειρά, η οποία έχει μετασχηματιστεί με τον ιό Epstein-Barr (EBV). Έχει χρησιμοποιηθεί ως πρότυπο Ti...

€550.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά GM12878 είναι μια καλά χαρακτηρισμένη ανθρώπινη λεμφοβλαστοειδής κυτταρική σειρά, μετασχηματισμένη με τον ιό Epstein-Barr (EBV). Έχει χρησιμοποιηθεί ως πρότυπη κυτταρική γραμμή Tier 1 στο πρόγραμμα Encyclopedia of DNA Elements (ENCODE), καθιστώντας την ένα από τα πιο ευρέως μελετημένα μοντέλα για γενετική και μεταγραφική έρευνα. Προερχόμενη από γυναίκα δότη, η GM12878 είναι γνωστή για τον σταθερό καρυότυπό της σε σύγκριση με τις πιο συχνά χρησιμοποιούμενες κυτταρικές σειρές όπως η HeLa και η HEK293, οι οποίες έχουν εκτεταμένη χρωμοσωμική ανευπλοειδία.

Αυτά τα κύτταρα είναι ιδιαίτερα πολύτιμα για την κατανόηση της δομής της χρωματίνης, της γονιδιακής ρύθμισης και της ανοσολογικής απόκρισης λόγω της Β-λεμφοκυτταρικής τους γραμμής. Τα κύτταρα GM12878 έχουν χρησιμοποιηθεί σε μελέτες υψηλής απόδοσης, συμπεριλαμβανομένων αναλύσεων ChIP-seq για τη χαρτογράφηση θέσεων πρόσδεσης μεταγραφικών παραγόντων και τροποποιήσεων ιστονών, MNase-seq για χαρτογράφηση νουκλεοσωμάτων και RNA-seq για προφίλ μεταγραφώματος. Μελέτες με τη συμμετοχή του GM12878 έχουν διευκρινίσει πτυχές των αλληλεπιδράσεων των μεταγραφικών παραγόντων, όπως η σύνδεση του FOXM1 και των συμπαράγοντών του, και τους ρόλους τους στα μονοπάτια του κυτταρικού κύκλου και της ανοσολογικής απόκρισης.

Επιπλέον, το GM12878 έχει χρησιμεύσει ως πλατφόρμα για πειράματα επεξεργασίας γονιδιώματος με στόχο τη δημιουργία υλικών αναφοράς για την επικύρωση της αλληλούχισης επόμενης γενιάς (NGS). Για παράδειγμα, τροποποιήσεις του γονιδιώματος με τη μεσολάβηση CRISPR/Cas9 έχουν εισαχθεί στο GM12878 για την ανάπτυξη υλικών ελέγχου για την ανάλυση μεταλλάξεων στον καρκίνο, καταδεικνύοντας την εφαρμογή του στην ιατρική ακριβείας και τις γενετικές εξετάσεις.

Ιστός
Περιφερικό αίμα
Συνώνυμα
  • GM-12878

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Αναστολή
Επίπεδο βιοασφάλειας
2

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Λεμφοβλάστες που μοιάζουν με λεμφοβλάστες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
GM12878 (αριθμός καταλόγου Cytion 305439)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_7526

05Έκφραση και ευαισθησία

Προφίλ μεταλλάξεων
Μετάλλαξη: Pro227Pro (c.681G>A)
Ιοί
Μετασχηματιστής: (EBV)

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
RPMI 1640, w: 2,0 mM σταθερής γλουταμίνης, w: 2,0 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820700a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 15% FBS
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Διατηρήστε τις καλλιέργειες προσθέτοντας ή αντικαθιστώντας περιοδικά το μέσο. Ξεκινήστε τις καλλιέργειες με πυκνότητα 5 x 105 κύτταρα/ml και διατηρήστε τη συγκέντρωση των κυττάρων εντός του εύρους 3 x 105 έως 1 x 106 κύτταρα/ml για βέλτιστη ανάπτυξη.
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Μετά την απόψυξη, αφήστε τα κύτταρα να ανακάμψουν από τη διαδικασία κατάψυξης για τουλάχιστον 24 ώρες
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
Απροσδιόριστο