Pāriet uz saturu
GM12878
Audums
Perifērās asinis
Sinonīmi
GM-12878

Dokumenti

GM12878

Cell line · Preces numurs 305439

Šūnu līnija GM12878 ir labi raksturota cilvēka limfoblastoīdu šūnu līnija, kas transformēta ar Epšteina-Barra vīrusu (EBV). Tā tiek izmantota kā standarta Ti...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

GM12878 šūnu līnija ir labi raksturota cilvēka limfoblastoīdu šūnu līnija, kas transformēta ar Epšteina-Barra vīrusu (EBV). Tā ir izmantota kā standarta 1. līmeņa šūnu līnija DNS elementu enciklopēdijas (ENCODE) projektā, padarot to par vienu no visplašāk pētītajiem modeļiem ģenētiskajiem un transkriptomikas pētījumiem. GM12878, kas iegūta no sieviešu dzimuma donorēm, ir pazīstama ar savu stabilo kariotipu salīdzinājumā ar biežāk izmantotajām šūnu līnijām, piemēram, HeLa un HEK293, kurām ir plaša hromosomu aneuploīdija.

Šīs šūnas ir īpaši vērtīgas, lai izprastu hromatīna struktūru, gēnu regulāciju un imūnreakciju, jo tās ir B-limfocītu līnija. GM12878 šūnas ir izmantotas augstas veiktspējas pētījumos, tostarp ChIP-seq analīzēs, lai kartētu transkripcijas faktoru saistīšanās vietas un histonu modifikācijas, MNase-seq nukleosomu kartēšanai un RNA-seq transkriptoma profilēšanai. Ar GM12878 veiktajos pētījumos ir noskaidroti tādi transkripcijas faktoru mijiedarbības aspekti kā FOXM1 un tā kofaktoru saistīšanās un to loma šūnu ciklā un imūnreakcijas ceļos.

Turklāt GM12878 ir kalpojis kā platforma genoma rediģēšanas eksperimentiem, kuru mērķis ir izveidot references materiālus nākamās paaudzes sekvenēšanas (NGS) validācijai. Piemēram, ar CRISPR/Cas9 starpniecību veiktas genoma modifikācijas GM12878, lai izstrādātu kontroles materiālus vēža mutāciju analīzei, tādējādi ilustrējot tā pielietojumu precīzajā medicīnā un ģenētiskajā testēšanā.

Audums
Perifērās asinis
Sinonīmi
  • GM-12878

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
2

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Limfoblastiem līdzīgs

04Identifikatori

Atsauce
GM12878 (Cytion kataloga numurs 305439)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_7526

05Pazīmes un uzņēmība

Mutāciju profils
Mutācija: CYP2C19, p.Pro227Pro (c.681G>A)
Vīrusi
Transformants: Epšteina-Barra vīruss (EBV)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 15% FBS
Pārstādīšana
Kultūras uzturiet, periodiski pievienojot vai nomainot barotni. Kultūras uzsāciet ar blīvumu 5 x 105 šūnas/ml un uzturiet šūnu koncentrāciju diapazonā no 3 x 105 līdz 1 x 106 šūnas/ml, lai nodrošinātu optimālu augšanu.
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas ļaujiet šūnām vismaz 24 stundas atgūties no sasaldēšanas procesa
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
Nav norādīts