GM12878
Cell line · Preces numurs 305439
Šūnu līnija GM12878 ir labi raksturota cilvēka limfoblastoīdu šūnu līnija, kas transformēta ar Epšteina-Barra vīrusu (EBV). Tā tiek izmantota kā standarta Ti...
Pielāgošana / Ieteikumi
- GM12878Cell line€550.00
01Vispārīga informācija
- Apraksts
GM12878 šūnu līnija ir labi raksturota cilvēka limfoblastoīdu šūnu līnija, kas transformēta ar Epšteina-Barra vīrusu (EBV). Tā ir izmantota kā standarta 1. līmeņa šūnu līnija DNS elementu enciklopēdijas (ENCODE) projektā, padarot to par vienu no visplašāk pētītajiem modeļiem ģenētiskajiem un transkriptomikas pētījumiem. GM12878, kas iegūta no sieviešu dzimuma donorēm, ir pazīstama ar savu stabilo kariotipu salīdzinājumā ar biežāk izmantotajām šūnu līnijām, piemēram, HeLa un HEK293, kurām ir plaša hromosomu aneuploīdija.
Šīs šūnas ir īpaši vērtīgas, lai izprastu hromatīna struktūru, gēnu regulāciju un imūnreakciju, jo tās ir B-limfocītu līnija. GM12878 šūnas ir izmantotas augstas veiktspējas pētījumos, tostarp ChIP-seq analīzēs, lai kartētu transkripcijas faktoru saistīšanās vietas un histonu modifikācijas, MNase-seq nukleosomu kartēšanai un RNA-seq transkriptoma profilēšanai. Ar GM12878 veiktajos pētījumos ir noskaidroti tādi transkripcijas faktoru mijiedarbības aspekti kā FOXM1 un tā kofaktoru saistīšanās un to loma šūnu ciklā un imūnreakcijas ceļos.
Turklāt GM12878 ir kalpojis kā platforma genoma rediģēšanas eksperimentiem, kuru mērķis ir izveidot references materiālus nākamās paaudzes sekvenēšanas (NGS) validācijai. Piemēram, ar CRISPR/Cas9 starpniecību veiktas genoma modifikācijas GM12878, lai izstrādātu kontroles materiālus vēža mutāciju analīzei, tādējādi ilustrējot tā pielietojumu precīzajā medicīnā un ģenētiskajā testēšanā.
- Audums
- Perifērās asinis
- Sinonīmi
- GM-12878
02Klasifikācija
- Organisms
- Cilvēks
- Sekss
- Sieviete
- Augšanas īpašības
- Atsperes
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 2
03Raksturlielumi
- Morfoloģija
- Limfoblastiem līdzīgs
04Identifikatori
- Atsauce
- GM12878 (Cytion kataloga numurs 305439)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_7526
05Pazīmes un uzņēmība
- Mutāciju profils
- Mutācija: CYP2C19, p.Pro227Pro (c.681G>A)
- Vīrusi
- Transformants: Epšteina-Barra vīruss (EBV)
06Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildināt barotni ar 15% FBS
- Pārstādīšana
- Kultūras uzturiet, periodiski pievienojot vai nomainot barotni. Kultūras uzsāciet ar blīvumu 5 x 105 šūnas/ml un uzturiet šūnu koncentrāciju diapazonā no 3 x 105 līdz 1 x 106 šūnas/ml, lai nodrošinātu optimālu augšanu.
- Atgūšanās pēc atkusņa
- Pēc atkausēšanas ļaujiet šūnām vismaz 24 stundas atgūties no sasaldēšanas procesa
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Sterilitāte
Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.
Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
08Ziedotājs
- Donora vecums
- Nav norādīts
09Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Nepieciešams materiālu nodošanas līgums
- Jā
