Gå direkte til indholdet
GM12878
Væv
Perifert blod
Synonymer
GM-12878

Dokumenter

GM12878

Cell line · Varenummer 305439

GM12878-cellelinjen er en velkarakteriseret human lymfoblastoidcellelinje, der er transformeret med Epstein-Barr-virus (EBV). Den er blevet anvendt som en standard Ti...

€550.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

GM12878-cellelinjen er en velkarakteriseret human lymfoblastoid-cellelinje, der er transformeret med Epstein-Barr-virus (EBV). Den er blevet brugt som en standard Tier 1-cellelinje i Encyclopedia of DNA Elements (ENCODE)-projektet, hvilket gør den til en af de mest undersøgte modeller til genetisk og transkriptomisk forskning. GM12878 stammer fra en kvindelig donor og er kendt for sin stabile karyotype sammenlignet med mere almindeligt anvendte cellelinjer som HeLa og HEK293, der har omfattende kromosomal aneuploidi.

Disse celler er særligt værdifulde til at forstå kromatinstruktur, genregulering og immunrespons på grund af deres B-lymfocytlinje. GM12878-celler er blevet anvendt i undersøgelser med høj kapacitet, herunder ChIP-seq-analyser til kortlægning af bindingssteder for transkriptionsfaktorer og histonmodifikationer, MNase-seq til kortlægning af nukleosomer og RNA-seq til transkriptomprofilering. Undersøgelser med GM12878 har belyst aspekter af transkriptionsfaktorinteraktioner, såsom bindingen af FOXM1 og dets co-faktorer, og deres roller i cellecyklus og immunresponsveje.

Desuden har GM12878 fungeret som en platform for genomredigeringseksperimenter med det formål at skabe referencematerialer til validering af next-generation sequencing (NGS). For eksempel er CRISPR/Cas9-medierede genomændringer blevet introduceret i GM12878 for at udvikle kontrolmaterialer til kræftmutationsanalyse, hvilket illustrerer dens anvendelse inden for præcisionsmedicin og genetisk testning.

Væv
Perifert blod
Synonymer
  • GM-12878

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Affjedring
Biosikkerhedsniveau
2

03Egenskaber

Morfologi
Lymfoblast-lignende

04Identifikatorer

Kildehenvisning
GM12878 (Cytion katalognummer 305439)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_7526

05Udtryk og modtagelighed

Mutationsprofil
Mutation: CYP2C19, p.Pro227Pro (c.681G>A)
Vira
Transformant: Epstein-Barr-virus (EBV)

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 15% FBS
Oddyrkning
Vedligehold kulturerne ved regelmæssigt at tilføje eller udskifte mediet. Start kulturerne med en tæthed på 5 x 105 celler/ml og hold cellekoncentrationen inden for området 3 x 105 til 1 x 106 celler/ml for optimal vækst.
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal du lade cellerne komme sig over fryseprocessen i mindst 24 timer
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
Uspecificeret