Langsung ke isi
GM12878
Tisu
Darah tepi
Sinonim
GM-12878

Dokumen

GM12878

Cell line · Nomor produk 305439

Baris sel GM12878 adalah baris sel limfoblastoid manusia yang telah dikarakterisasi dengan baik, yang mengalami transformasi akibat virus Epstein-Barr (EBV). Baris sel ini telah digunakan sebagai standar Ti...

€550.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

Garis sel GM12878 adalah garis sel limfoblastoid manusia yang dikarakterisasi dengan baik, yang ditransformasikan dengan virus Epstein-Barr (EBV). Ini telah digunakan sebagai garis sel Tier 1 standar dalam proyek Encyclopedia of DNA Elements (ENCODE), menjadikannya salah satu model yang paling banyak dipelajari untuk penelitian genetik dan transkriptomik. Berasal dari donor wanita, GM12878 dikenal dengan kariotipe yang stabil dibandingkan dengan lini sel yang lebih umum digunakan seperti HeLa dan HEK293, yang memiliki aneuploidi kromosom yang luas.

Sel-sel ini sangat berharga untuk memahami struktur kromatin, regulasi gen, dan respons imun karena garis keturunan limfosit B mereka. Sel GM12878 telah digunakan dalam penelitian dengan kecepatan tinggi, termasuk analisis ChIP-seq untuk memetakan situs pengikatan faktor transkripsi dan modifikasi histon, MNase-seq untuk pemetaan nukleosom, dan RNA-seq untuk pembuatan profil transkriptom. Studi yang melibatkan GM12878 telah menjelaskan aspek-aspek interaksi faktor transkripsi, seperti pengikatan FOXM1 dan faktor-faktornya, dan peran mereka dalam siklus sel dan jalur respons imun.

Selain itu, GM12878 telah berfungsi sebagai platform untuk eksperimen pengeditan genom yang bertujuan untuk membuat bahan referensi untuk validasi sekuensing generasi berikutnya (NGS). Sebagai contoh, modifikasi genom yang dimediasi CRISPR/Cas9 telah diperkenalkan ke dalam GM12878 untuk mengembangkan bahan kontrol untuk analisis mutasi kanker, yang mengilustrasikan aplikasinya dalam pengobatan presisi dan pengujian genetik.

Tisu
Darah tepi
Sinonim
  • GM-12878

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Penangguhan
Tingkat keamanan hayati
2

03Karakteristik

Morfologi
Seperti limfoblas

04Pengidentifikasi

Referensi
GM12878 (Nomor katalog Cytion 305439)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_7526

05Ekspresi dan kerentanan

Profil mutasi
Mutasi: CYP2C19, p.Pro227Pro (c.681G>A)
Virus
Transforman: Virus Epstein-Barr (EBV)

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
RPMI 1640, w: 2,0 mM Glutamin stabil, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820700a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Lengkapi media dengan 15% FBS
Perbanyakan sel
Pertahankan kultur dengan secara berkala menambahkan atau mengganti medium. Mulailah kultur dengan kepadatan 5 x 10⁵ sel/ml dan jaga konsentrasi sel dalam rentang 3 x 10⁵ hingga 1 x 10⁶ sel/ml untuk pertumbuhan optimal.
Pemulihan pasca-pencairan
Setelah dicairkan, biarkan sel pulih dari proses pembekuan setidaknya selama 24 jam
Pencairan dan pembiakan

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
Tidak ditentukan