İçeriğe atla
GM12878
Doku
Periferik kan
Eş anlamlılar
GM-12878

GM12878

Cell line · Ürün numarası 305439

GM12878 hücre hattı, Epstein-Barr virüsü (EBV) ile dönüştürülmüş, özellikleri iyi tanımlanmış bir insan lenfoblastoid hücre hattıdır. Standart bir Ti... olarak kullanılmaktadır.

€550.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

GM12878 hücre hattı, Epstein-Barr virüsü (EBV) ile dönüştürülmüş, iyi karakterize edilmiş bir insan lenfoblastoid hücre hattıdır. Encyclopedia of DNA Elements (ENCODE) projesinde standart bir Tier 1 hücre hattı olarak kullanılmış ve genetik ve transkriptomik araştırmalar için en yaygın çalışılan modellerden biri olmuştur. Bir kadın donörden elde edilen GM12878, HeLa ve HEK293 gibi daha yaygın olarak kullanılan ve geniş kromozomal anöploidiye sahip hücre hatlarına kıyasla stabil karyotipiyle bilinmektedir.

Bu hücreler, B-lenfosit soyları nedeniyle kromatin yapısını, gen düzenlemesini ve bağışıklık tepkisini anlamak için özellikle değerlidir. GM12878 hücreleri, transkripsiyon faktörü bağlanma bölgelerini ve histon modifikasyonlarını haritalamak için ChIP-seq analizleri, nükleozom haritalaması için MNase-seq ve transkriptom profili için RNA-seq dahil olmak üzere yüksek verimli çalışmalarda kullanılmıştır. GM12878'i içeren çalışmalar, FOXM1 ve yardımcı faktörlerinin bağlanması ve bunların hücre döngüsü ve bağışıklık yanıtı yollarındaki rolleri gibi transkripsiyon faktörü etkileşimlerinin yönlerini aydınlatmıştır.

Ayrıca GM12878, yeni nesil dizileme (NGS) doğrulaması için referans materyaller oluşturmayı amaçlayan genom düzenleme deneyleri için bir platform görevi görmüştür. Örneğin, CRISPR/Cas9 aracılı genom modifikasyonları, kanser mutasyon analizi için kontrol materyalleri geliştirmek üzere GM12878'e eklenmiş ve hassas tıp ve genetik testlerdeki uygulamasını göstermiştir.

Doku
Periferik kan
Eş anlamlılar
  • GM-12878

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Askıya alma
Biyogüvenlik seviyesi
2

03Özellikler

Morfoloji
Lenfoblast benzeri

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
GM12878 (Cytion katalog numarası 305439)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_7526

05İfade ve duyarlılık

Mutasyon profili
Mutasyon: CYP2C19, p.Pro227Pro (c.681G>A)
Virüsler
Transformant: Epstein-Barr virüsü (EBV)

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %15 FBS ile takviye edin
Alt kültür oluşturma
Kültürleri, besiyerini periyodik olarak ekleyerek veya değiştirerek muhafaza edin. Kültürleri 5 x 105 hücre/ml yoğunlukta başlatın ve optimal büyüme için hücre konsantrasyonunu 3 x 105 ila 1 x 106 hücre/ml aralığında tutun.
Çözülme sonrası toparlanma
Çözüldükten sonra, hücrelerin en az 24 saat boyunca dondurma işleminden kurtulmasına izin verin
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
Belirtilmemiş