PLH

PLH ląstelių linija yra Epšteino-Baro viruso (EBV) transformuota žmogaus limfoblastoidinių ląstelių linija, gauta iš paciento, sergančio įgimta antinksčių hiperplazija (CAH) dėl steroidų 21-hidroksilazės (21-OHazės) trūkumo. Šis autosominis recesyvinis sutrikimas, dėl kurio sutrinka kortizolio biosintezė, yra glaudžiai susijęs su tam tikrais HLA haplotipais, ypač HLA-Bw47;DR7. PLH linija yra homozigotinė šiam haplotipui ir buvo naudojama kaip genetinis modelis 21-OHazės trūkumo molekuliniam pagrindui tirti. Ji ypač vertinga tiriant genų delecijas, turinčias įtakos citochromo P-450C21 genui, atsakingam už 21-hidroksilinimą, kuris yra esminis kortizolio gamybos etapas. Molekulinės analizės, atliktos naudojant DNR zondus, patvirtino, kad PLH ląstelėms būdinga homozigotinė vieno iš dviejų P-450C21 genų delecija, kuri atitinka 21-hidroksilazės aktyvumo praradimą, pastebėtą sergančių asmenų organizme.

PLH ląstelių linija buvo Ketvirtojo Azijos ir Okeanijos histokompatibilumo seminaro (4AOHW) grupės, kurios tikslas - sukurti gerai apibūdintą EBV transformuotų limfoblastoidinių ląstelių linijų, atstovaujančių įvairiems MHC aleliams ir haplotipams, rinkinį. Šios grupės yra svarbūs šaltiniai histokompatibilumo tyrimams, HLA tipizacijai kurti ir imunogenetikos tyrimams. PLH pasirinkimas įtraukti į 4AOHW atspindi unikalų MHC genotipą ir svarbą ligoms, nes tai padeda standartizuoti HLA alelių priskyrimą ir atlikti su imunitetu susijusių sutrikimų genetinės struktūros tyrimus.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime