PLH

PLH šūnu līnija ir Epšteina-Barra vīrusa (EBV) transformēta cilvēka limfoblastoīdu šūnu līnija, kas iegūta no pacienta ar iedzimtu virsnieru hiperplāziju (CAH), ko izraisījis steroīdu 21-hidroksilāzes (21-OHāzes) deficīts. Šī autosomāli recesīvā slimība, kas traucē kortizola biosintēzi, ir cieši saistīta ar specifiskiem HLA haplotipiem, īpaši HLA-Bw47;DR7. PLH līnija ir homozigotiska šim haplotipam, un to izmanto kā ģenētisko modeli, lai pētītu 21-OHāzes deficīta molekulāro pamatu. Tā ir īpaši vērtīga, pētot gēnu izdzēšanu, kas ietekmē citohroma P-450C21 gēnu, kurš ir atbildīgs par 21-hidroksilēšanu, kas ir būtisks kortizola ražošanas posms. Molekulārās analīzes, izmantojot DNS zondes, apstiprināja, ka PLH šūnām ir homozigotiska viena no diviem P-450C21 gēniem delecija, kas atbilst 21-hidroksilāzes aktivitātes zudumam, kas novērots skartajiem indivīdiem.

PLH šūnu līnija bija daļa no Ceturtā Āzijas un Okeānijas Histokompatibilitātes semināra (4AOHW) paneļa, kura mērķis bija nodrošināt labi raksturotu ar EBV transformētu limfoblastoīdu šūnu līniju kopumu, kas pārstāv dažādas MHC alēles un haplotipus. Šie paneļi kalpo kā būtiski resursi histokompatibilitātes pētījumiem, HLA tipizācijas izstrādei un imūnģenētikas pētījumiem. PLH atlase iekļaušanai 4AOHW atspoguļo tās unikālo MHC genotipu un nozīmīgumu slimībām, veicinot gan HLA alēļu piešķiršanas standartizāciju, gan pētījumus, kuros tiek pētīta ar imunitāti saistītu traucējumu ģenētiskā struktūra.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu