PLH

Dòng tế bào PLH là một dòng tế bào lymphoblastoid người được biến đổi bởi virus Epstein-Barr (EBV), được phân lập từ một bệnh nhân mắc chứng tăng sản tuyến thượng thận bẩm sinh (CAH) do thiếu hụt enzym 21-hydroxylase (21-OHase). Rối loạn di truyền lặn trên nhiễm sắc thể thường này, gây suy giảm tổng hợp cortisol, có liên quan chặt chẽ với các haplotype HLA cụ thể, đặc biệt là HLA-Bw47;DR7. Dòng tế bào PLH mang kiểu gen đồng hợp tử cho haplotype này và đã được sử dụng làm mô hình di truyền để nghiên cứu cơ sở phân tử của thiếu hụt 21-OHase. Nó đặc biệt hữu ích trong việc nghiên cứu các đột biến gen ảnh hưởng đến gen cytochrome P-450C21, chịu trách nhiệm cho quá trình 21-hydroxylation, một bước quan trọng trong sản xuất cortisol. Các phân tích phân tử sử dụng các probe DNA đã xác nhận rằng các tế bào PLH có sự xóa đồng hợp tử của một trong hai gen P-450C21, phù hợp với sự mất hoạt động của 21-hydroxylase được quan sát thấy ở các cá thể bị ảnh hưởng.

Dòng tế bào PLH là một phần của bảng mẫu Fourth Asia-Oceania Histocompatibility Workshop (4AOHW), nhằm cung cấp một bộ sưu tập được đặc trưng kỹ lưỡng các dòng tế bào lymphoblastoid được biến đổi bởi EBV, đại diện cho các alen và haplotype MHC đa dạng. Các bảng mẫu này đóng vai trò là nguồn tài nguyên thiết yếu cho các nghiên cứu về tương thích mô, phát triển định typ HLA và nghiên cứu di truyền miễn dịch. Việc lựa chọn PLH để đưa vào 4AOHW phản ánh kiểu gen MHC độc đáo và tính liên quan đến bệnh tật của nó, góp phần vào việc tiêu chuẩn hóa việc gán alen HLA và các nghiên cứu khám phá cấu trúc di truyền của các rối loạn liên quan đến miễn dịch.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.