PLH

เซลล์ไลน์ PLH เป็นเซลล์ไลน์ลิมโฟบลาสต์ของมนุษย์ที่ถูกเปลี่ยนแปลงโดยไวรัสเอปสไตน์-บาร์ (EBV) ซึ่งได้มาจากผู้ป่วยที่มีภาวะต่อมหมวกไตเจริญเกินแต่กำเนิด (CAH) อันเนื่องมาจากภาวะขาดเอนไซม์สเตียรอยด์ 21-ไฮดรอกซิเลส (21-OHase) ความผิดปกติทางพันธุกรรมแบบยีนด้อยบนโครโมโซมคู่ที่ 2 นี้ ซึ่งส่งผลต่อการสังเคราะห์คอร์ติซอล มีความเชื่อมโยงอย่างมากกับฮัปโลไทป์ HLA เฉพาะ โดยเฉพาะ HLA-Bw47;DR7สายพันธุ์ PLH เป็นโฮโมไซกัสสำหรับแฮพโลไทป์นี้และได้ถูกใช้เป็นแบบจำลองทางพันธุกรรมเพื่อศึกษาพื้นฐานทางโมเลกุลของการขาดเอนไซม์ 21-OHase ซึ่งมีคุณค่าอย่างยิ่งในการศึกษาการลบยีนที่ส่งผลต่อยีนไซโตโครม P-450C21 ซึ่งเป็นผู้รับผิดชอบในการเกิดปฏิกิริยาไฮดรอกซิเลชันที่ตำแหน่ง 21 ซึ่งเป็นขั้นตอนสำคัญในการผลิตคอร์ติซอลการวิเคราะห์ระดับโมเลกุลโดยใช้ตัวตรวจจับดีเอ็นเอได้ยืนยันว่าเซลล์ PLH มีการลบยีน P-450C21 หนึ่งในสองยีนแบบโฮโมไซกัส ซึ่งสอดคล้องกับการสูญเสียกิจกรรมของเอนไซม์ 21-ไฮดรอกซิเลสที่พบในผู้ป่วยที่ได้รับผลกระทบ

เซลล์ไลน์ PLH เป็นส่วนหนึ่งของแผงเซลล์ในงานประชุมเชิงปฏิบัติการด้านฮิสโตคอมแพตทิบิลิตี้แห่งเอเชีย-โอเชียเนียครั้งที่สี่ (4AOHW) ซึ่งมีวัตถุประสงค์เพื่อจัดเตรียมชุดเซลล์ไลน์ลิมโฟบลาสต์ที่เปลี่ยนแปลงด้วย EBV ที่มีลักษณะเฉพาะอย่างชัดเจน ซึ่งแทนตัวแทนของอัลลีลและฮาพโลไทป์ของ MHC ที่หลากหลาย แผงเซลล์เหล่านี้ทำหน้าที่เป็นทรัพยากรสำคัญสำหรับการศึกษาด้านฮิสโตคอมแพตทิบิลิตี้ การพัฒนาการจำแนก HLA และการวิจัยด้านภูมิคุ้มกันพันธุศาสตร์การคัดเลือก PLH ให้รวมอยู่ใน 4AOHW สะท้อนถึงลักษณะพันธุกรรม MHC ที่ไม่เหมือนใครและความเกี่ยวข้องกับโรค ซึ่งช่วยส่งเสริมทั้งการมาตรฐานการจัดสรร HLA allele และการศึกษาที่สำรวจโครงสร้างทางพันธุกรรมของความผิดปกติที่เกี่ยวข้องกับระบบภูมิคุ้มกัน

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.