PLH

PLH-cellelinjen er en Epstein-Barr-virus (EBV)-transformert human lymfoblastoid cellelinje som stammer fra en pasient med medfødt binyrebarkhyperplasi (CAH) på grunn av steroid 21-hydroksylase (21-OHase)-mangel. Denne autosomale recessive lidelsen, som svekker biosyntesen av kortisol, er sterkt knyttet til spesifikke HLA-haplotyper, særlig HLA-Bw47;DR7. PLH-linjen er homozygot for denne haplotypen og har blitt brukt som en genetisk modell for å undersøke det molekylære grunnlaget for 21-OHase-mangel. Den er spesielt verdifull når det gjelder å studere gendelesjoner som påvirker cytokrom P-450C21-genet, som er ansvarlig for 21-hydroksylering, et avgjørende trinn i kortisolproduksjonen. Molekylære analyser ved hjelp av DNA-sonder bekreftet at PLH-celler har en homozygot delesjon av ett av de to P-450C21-genene, noe som stemmer overens med tapet av 21-hydroksylaseaktivitet som er observert hos de berørte individene.

PLH-cellelinjen var en del av det fjerde Asia-Oceania Histocompatibility Workshop (4AOHW)-panelet, som hadde som mål å tilby et velkarakterisert sett med EBV-transformerte lymfoblastoide cellelinjer som representerer ulike MHC-alleler og haplotyper. Disse panelene er viktige ressurser for histokompatibilitetsstudier, utvikling av HLA-typing og immunogenetisk forskning. PLH ble valgt ut til å inngå i 4AOHW på grunn av sin unike MHC-genotype og sykdomsrelevans, noe som bidrar til både standardisering av HLA-alleltildelinger og studier som utforsker den genetiske arkitekturen til immunrelaterte lidelser.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring