PLH

PLH細胞株は、ステロイド21水酸化酵素（21-OHase）欠損症による先天性副腎過形成症（CAH）患者由来のエプスタイン・バー・ウイルス（EBV）形質転換ヒトリンパ芽球系細胞株である。コルチゾールの生合成に障害をきたすこの常染色体劣性障害は、特定のHLAハプロタイプ、特にHLA-Bw47;DR7と強く関連している。PLH株はこのハプロタイプのホモ接合体であり、21-OHase欠損症の分子基盤を研究する遺伝モデルとして用いられてきた。この系統は、コルチゾール産生における重要なステップである21-ヒドロキシル化を担うチトクロームP-450C21遺伝子に影響を及ぼす遺伝子欠失を研究する上で特に有用である。DNAプローブを用いた分子生物学的解析により、PLH細胞は2つのP-450C21遺伝子のうち1つがホモ接合性に欠失し、罹患者に観察される21-ヒドロキシラーゼ活性の消失と一致していることが確認された。

このPLH細胞株は、第4回アジア・オセアニア組織適合性ワークショップ（4AOHW）パネルの一部であり、多様なMHC対立遺伝子とハプロタイプを代表するEBV形質転換リンパ芽球細胞株のよく特徴付けられたセットを提供することを目的としている。これらのパネルは、組織適合性研究、HLAタイピングの開発、免疫遺伝学研究に不可欠なリソースとして役立っている。4AOHWにPLHが選ばれたのは、そのユニークなMHC遺伝子型と疾患との関連性を反映したものであり、HLA対立遺伝子の割り当ての標準化と、免疫関連疾患の遺伝的構造を探る研究の両方に貢献するものである。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。