PLH

Клітинна лінія PLH - це трансформована вірусом Епштейна-Барр (EBV) лінія лімфобластоїдних клітин людини, отримана від пацієнта з вродженою гіперплазією надниркових залоз (ВГНЗ) через дефіцит стероїдної 21-гідроксилази (21-ОНА). Це аутосомно-рецесивне захворювання, яке порушує біосинтез кортизолу, тісно пов'язане з певними гаплотипами HLA, зокрема HLA-Bw47;DR7. Лінія PLH є гомозиготною за цим гаплотипом і була використана як генетична модель для дослідження молекулярних основ дефіциту 21-ОГази. Вона особливо цінна для вивчення делецій генів, що впливають на ген цитохрому P-450C21, який відповідає за 21-гідроксилювання, вирішальний етап у виробництві кортизолу. Молекулярний аналіз з використанням ДНК-зондів підтвердив, що клітини ЛЖВ мають гомозиготну делецію одного з двох генів P-450C21, що узгоджується з втратою активності 21-гідроксилази, яка спостерігається в уражених осіб.

Клітинна лінія PLH була частиною панелі Четвертого семінару з гістосумісності в Азії та Океанії (4AOHW), метою якого було створення добре охарактеризованого набору трансформованих EBV лімфобластоїдних клітинних ліній, що представляють різні алелі та гаплотипи MHC. Ці панелі слугують важливими ресурсами для досліджень гістосумісності, розробки HLA-типування та імуногенетичних досліджень. Вибір ЛЖК для включення в 4AOHW відображає їх унікальний генотип MHC і релевантність захворювання, що сприяє як стандартизації визначення алелів HLA, так і дослідженням, що вивчають генетичну архітектуру імунозалежних розладів.

37°C, 5% _CO2, волога атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту

Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>