PLH

Garis sel PLH adalah garis sel limfoblastoid manusia yang diubah oleh virus Epstein-Barr (EBV) yang berasal dari pasien dengan hiperplasia adrenal kongenital (CAH) akibat defisiensi steroid 21-hidroksilase (21-OHase). Kelainan resesif autosomal ini, yang mengganggu biosintesis kortisol, sangat terkait dengan haplotipe HLA tertentu, khususnya HLA-Bw47; DR7. Garis PLH adalah homozigot untuk haplotipe ini dan telah digunakan sebagai model genetik untuk menyelidiki dasar molekuler defisiensi 21-OHase. Hal ini sangat berharga dalam mempelajari penghapusan gen yang mempengaruhi gen sitokrom P-450C21, yang bertanggung jawab atas 21-hidroksilasi, sebuah langkah penting dalam produksi kortisol. Analisis molekuler menggunakan probe DNA mengkonfirmasi bahwa sel PLH menunjukkan penghapusan homozigot salah satu dari dua gen P-450C21, konsisten dengan hilangnya aktivitas 21-hidroksilase yang diamati pada individu yang terkena.

Garis sel PLH adalah bagian dari panel Lokakarya Histokompatibilitas Asia-Oseania Keempat (4AOHW), yang bertujuan untuk menyediakan serangkaian garis sel limfoblastoid yang ditransformasi EBV yang dikarakterisasi dengan baik yang mewakili beragam alel dan haplotipe MHC. Panel-panel ini berfungsi sebagai sumber daya penting untuk studi histokompatibilitas, pengembangan pengetikan HLA, dan penelitian imunogenetika. Pemilihan PLH untuk dimasukkan ke dalam 4AOHW mencerminkan genotipe MHC yang unik dan relevansi penyakitnya, yang berkontribusi pada standarisasi penetapan alel HLA dan studi yang mengeksplorasi arsitektur genetik dari gangguan terkait kekebalan tubuh.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami